La cromatografia liquida con spettrometria di massa tandem (LC-MS-MS) è una tecnica analitica potente che combina il potere di separazione della cromatografia liquida con la capacità di analisi di massa altamente sensibile e selettiva della spettrometria di massa a triplo quadrupolo.
Una soluzione campione contenente analiti di interesse viene pompata attraverso una fase stazionaria (colonna LC) da una fase mobile che scorre ad alta pressione. L’interazione chimica tra i componenti del campione, la fase stazionaria e la fase mobile influisce sulle diverse velocità di migrazione attraverso la colonna LC influenzando una separazione. L’ampia varietà di combinazioni di fase stazionaria e fase mobile permette di personalizzare una separazione per adattarsi a molte soluzioni complesse.
Dopo l’eluizione dalla colonna LC, l’effluente è diretto allo spettrometro di massa. Lo spettrometro di massa per un sistema LC/MS/MS ha una fonte di ionizzazione dove l’effluente della colonna LC viene nebulizzato, desolvato e ionizzato creando particelle cariche. Queste particelle cariche poi migrano sotto alto vuoto attraverso una serie di analizzatori di massa (quadrupolo) applicando campi elettromagnetici. Uno specifico ione precursore di massa/carica (o ione genitore) è destinato a passare attraverso il primo quadrupolo, escludendo tutte le altre particelle con rapporto massa/carica. Nella cella di collisione, gli ioni di massa/carica selezionati vengono poi frammentati in ioni prodotto (o ioni figlia) per collisione con un gas inerte. Il terzo quadrupolo è utilizzato per mirare a specifici frammenti di ioni prodotto. Gli ioni prodotto isolati risultanti sono poi quantificati con un moltiplicatore di elettroni. Questa transizione di ioni dal precursore allo ione prodotto (indicata anche come MS2) è altamente specifica per la struttura del composto di interesse e quindi fornisce un alto grado di selettività.
La forza di questa tecnica risiede nel potere di separazione della LC per una vasta gamma di composti combinata con la capacità della MS di quantificare i composti con un alto grado di sensibilità e selettività in base alle transizioni massa/carica (m/z) uniche di ogni composto di interesse.
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