Kapalinová chromatografie v normální fázi (NPLC) je technika, která k rozdělení složek směsí používá kolony naplněné polárními stacionárními fázemi v kombinaci s nepolárními nebo středně polárními mobilními fázemi. Rychlost, jakou jednotlivé rozpuštěné látky migrují kolonami NPLC, je především funkcí jejich polarity. Méně polární rozpuštěné látky se pohybují nejrychleji, a proto opouštějí kolonu a jsou detekovány jako první, následovány rozpuštěnými látkami s rostoucí polaritou, které se pohybují pomaleji. Polarita však někdy může hrát druhotnou roli vzhledem ke schopnosti rozpuštěné látky vyvolat specifickou interakci s aktivními místy na povrchu stacionární fáze. Význam těchto specifických interakcí mezi rozpuštěnou látkou a stacionární fází v NPLC jí dává některé jedinečné výhody oproti technice kapalinové chromatografie s obrácenou fází (RPLC), která je v praxi rozšířenější. RPLC využívá nepolární stacionární fáze a polární mobilní fáze na vodní bázi a pořadí eluce rozpuštěných látek ve směsi souvisí s jejich hydrofobností, nikoli polaritou; polárnější rozpuštěné látky se pohybují nejrychleji a objevují se jako první, následovány rozpuštěnými látkami s klesající polaritou. RPLC je užitečná pro dělení směsí, jejichž složky se liší molekulovou hmotností a/nebo rozpustností ve vodě. NPLC se však upřednostňuje pro mnoho separačních problémů, včetně těch, kde je rozpustnost sloučenin vzorku ve vodě omezená. Kromě toho je NPLC lepší technikou pro separaci sloučenin, které se liší počtem nebo charakterem funkčních skupin, a je zvláště užitečná pro separaci mnoha typů izomerů

.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.