La cromatografía líquida de fase normal (NPLC) es una técnica que utiliza columnas empaquetadas con fases estacionarias polares combinadas con fases móviles no polares o moderadamente polares para separar los componentes de las mezclas. La velocidad a la que los solutos individuales migran a través de las columnas de NPLC es principalmente una función de su polaridad. Los solutos menos polares son los que se mueven más rápidamente y, por tanto, salen de la columna y se detectan primero, seguidos de los solutos de polaridad creciente que se mueven más lentamente. Sin embargo, la polaridad puede desempeñar a veces un papel secundario en relación con la capacidad de un soluto para experimentar una interacción específica con los sitios activos de la superficie de la fase estacionaria. La importancia de estas interacciones específicas entre el soluto y la fase estacionaria en la NPLC le confiere algunas ventajas únicas con respecto a la técnica de cromatografía líquida de fase inversa (RPLC), más extendida. La RPLC utiliza fases estacionarias no polares y fases móviles de base acuosa, y el orden de elución de los solutos en una mezcla está relacionado con su hidrofobicidad, no con la polaridad; los solutos más polares son los que se mueven más rápido y aparecen primero, seguidos por los solutos de polaridad decreciente. La RPLC es útil para separar mezclas en las que los componentes difieren en peso molecular y/o solubilidad en agua. Sin embargo, se prefiere la NPLC para muchos problemas de separación, incluidos aquellos en los que la solubilidad en agua de los compuestos de la muestra es limitada. Además, la NPLC es una técnica mejor para separar compuestos que difieren en el número o carácter de los grupos funcionales y es particularmente útil para separar muchos tipos de isómeros.
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