La cromatografía líquida con espectrometría de masas en tándem (LC-MS-MS) es una potente técnica analítica que combina el poder de separación de la cromatografía líquida con la capacidad de análisis de masas altamente sensible y selectiva de la espectrometría de masas de triple cuadrupolo.
Una solución de muestra que contiene los analitos de interés se bombea a través de una fase estacionaria (columna LC) mediante una fase móvil que fluye a alta presión. La interacción química entre los componentes de la muestra, la fase estacionaria y la fase móvil afecta a las diferentes velocidades de migración a través de la columna de LC, afectando a una separación. La amplia variedad de combinaciones de fase estacionaria y fase móvil permite personalizar una separación para adaptarla a muchas soluciones complejas.
Después de la elución de la columna de LC, el efluente se dirige al espectrómetro de masas. El espectrómetro de masas de un sistema LC/MS/MS tiene una fuente de ionización en la que el efluente de la columna de LC se nebuliza, se desuelve y se ioniza creando partículas cargadas. A continuación, estas partículas cargadas migran bajo alto vacío a través de una serie de analizadores de masas (cuadrupolo) mediante la aplicación de campos electromagnéticos. Un ión precursor de masa/carga específico (o ión padre) es seleccionado para pasar a través del primer cuadrupolo, excluyendo todas las demás partículas de relación masa/carga. En la célula de colisión, los iones de masa/carga seleccionados se fragmentan en iones producto (o iones hijos) por colisión con un gas inerte. El tercer cuadrupolo se utiliza para dirigir fragmentos de iones producto específicos. Los iones producto aislados resultantes se cuantifican con un multiplicador de electrones. Esta transición de iones del precursor al ion producto (también denominada MS2) es altamente específica para la estructura del compuesto de interés y, por tanto, proporciona un alto grado de selectividad.
La fuerza de esta técnica radica en el poder de separación de la LC para una amplia gama de compuestos combinada con la capacidad de la MS para cuantificar compuestos con un alto grado de sensibilidad y selectividad basado en las transiciones masa/carga (m/z) únicas de cada compuesto de interés.
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