Normaalifaasinen nestekromatografia (NPLC) on tekniikka, jossa käytetään polaarisiin stationäärifaaseihin pakattuja kolonneja yhdistettynä poolittomiin tai kohtalaisen poolisiin liikkuviin faaseihin seosten komponenttien erottamiseen. Nopeus, jolla yksittäiset liuenneet aineet siirtyvät NPLC-kolonnien läpi, riippuu ensisijaisesti niiden poolisuudesta. Vähemmän pooliset liuokset liikkuvat nopeimmin, minkä vuoksi ne poistuvat pylväästä ja havaitaan ensimmäisinä, minkä jälkeen tulevat hitaammin liikkuvat yhä poolisemmat liuokset. Joskus polaarisuudella voi kuitenkin olla toissijainen merkitys suhteessa liuenneen aineen kykyyn saada aikaan erityinen vuorovaikutus stationäärifaasin pinnan aktiivisten kohtien kanssa. Näiden erityisten liuottimen ja pysyvän faasin välisten vuorovaikutusten merkitys NPLC:ssä antaa sille joitakin ainutlaatuisia etuja verrattuna yleisemmin käytettyyn käänteisfaasinestekromatografiatekniikkaan (RPLC). RPLC:ssä käytetään poolittomia stationäärifaaseja ja vesipohjaisia polaarisia liikkuvia faaseja, ja seoksessa olevien liuottimien eluoitumisjärjestys liittyy niiden hydrofobisuuteen, ei poolisuuteen; polaarisemmat liuottimet liikkuvat nopeimmin ja esiintyvät ensimmäisinä, minkä jälkeen tulevat vähemmän pooliset liuottimet. RPLC on käyttökelpoinen sellaisten seosten erottamiseen, joiden komponentit eroavat toisistaan molekyylipainoltaan ja/tai vesiliukoisuudeltaan. NPLC on kuitenkin suositeltavampi menetelmä monissa erotusongelmissa, myös niissä, joissa näyteyhdisteiden vesiliukoisuus on rajallinen. Lisäksi NPLC on parempi tekniikka erotettaessa yhdisteitä, jotka eroavat toisistaan funktionaalisten ryhmien lukumäärän tai luonteen suhteen, ja se on erityisen käyttökelpoinen monenlaisten isomeerien erottamiseen.
Free Press
everywhere