La chromatographie liquide avec spectrométrie de masse en tandem (LC-MS-MS) est une technique analytique puissante qui combine le pouvoir de séparation de la chromatographie liquide avec la capacité d’analyse de masse hautement sensible et sélective de la spectrométrie de masse triple quadripolaire.
Une solution échantillon contenant des analytes d’intérêt sont pompés à travers une phase stationnaire (colonne LC) par une phase mobile s’écoulant à haute pression. L’interaction chimique entre les composants de l’échantillon, la phase stationnaire et la phase mobile affecte différentes vitesses de migration à travers la colonne LC affectant une séparation. La grande variété de combinaisons de phase stationnaire et de phase mobile permet de personnaliser une séparation pour convenir à de nombreuses solutions complexes.
Après élution de la colonne LC, l’effluent est dirigé vers le spectromètre de masse. Le spectromètre de masse d’un système LC/MS/MS possède une source d’ionisation où l’effluent de la colonne LC est nébulisé, désolvaté et ionisé créant des particules chargées. Ces particules chargées migrent ensuite sous vide poussé à travers une série d’analyseurs de masse (quadripôles) en appliquant des champs électromagnétiques. Un ion précurseur de masse/charge spécifique (ou ion parent) est ciblé pour passer à travers le premier quadrupôle, excluant toutes les autres particules de rapport masse/charge. Dans la cellule de collision, les ions de masse/charge sélectionnés sont ensuite fragmentés en ions produits (ou ions filles) par collision avec un gaz inerte. Le troisième quadripôle est utilisé pour cibler des fragments d’ions produits spécifiques. Les ions produits isolés qui en résultent sont ensuite quantifiés à l’aide d’un multiplicateur d’électrons. Cette transition des ions du précurseur à l’ion produit (également appelée MS2) est hautement spécifique de la structure du composé d’intérêt et fournit donc un haut degré de sélectivité.
La force de cette technique réside dans le pouvoir de séparation de la LC pour une large gamme de composés, combiné à la capacité de la MS à quantifier les composés avec un haut degré de sensibilité et de sélectivité basé sur les transitions masse/charge (m/z) uniques de chaque composé d’intérêt.
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