Dai primi anni del 1900, i medici hanno usato l’argento colloidale per via orale, topica e endovenosa come trattamento per varie condizioni causate da virus, batteri e funghi. È stato considerato da altri una terapia “curativa”. L’argento è stato poi disponibile in diverse preparazioni come il nitrato d’argento per la profilassi dell’oftalmia neonatale e la sulfadiazina d’argento per le lesioni da ustione. Con l’avvento di antibiotici più potenti, l’argento è diventato meno popolare. Sono stati notati anche effetti avversi dell’esposizione cronica all’argento, come l’argiria sistemica e in qualche misura l’argiria oculare. Questo può essere dovuto a preparazioni di qualità inferiore che contribuiscono ulteriormente alla tossicità. Nel campo della medicina alternativa, tuttavia, c’è una rinascita nell’uso dell’argento colloidale. Viene ora prescritto per numerose malattie, compresa la congiuntivite. L’argento colloidale è composto da nanoparticelle di argento sospese in soluzione. Le particelle d’argento sono così minute che non sono influenzate dalla gravità mentre si disperdono uniformemente nell’acqua. Quindi, non si vedono sedimenti nelle preparazioni di argento colloidale di qualità superiore. La dimensione delle particelle d’argento è essenziale, idealmente va da 0.05 a 0.01microns. La dimensione delle particelle d’argento influenza la sua capacità di essere assorbita dal corpo senza causare alcun danno cellulare ai tessuti umani a basse dosi. L’unico effetto negativo è l’argiria. L’argento colloidale, la forma biologicamente più attiva dell’argento, è prontamente assorbita dal corpo.
Il meccanismo d’azione dell’argento sui microbi è detto essere al livello della membrana cellulare. Colpisce la funzione degli enzimi legati alla membrana, come quelli coinvolti nella catena respiratoria, attraverso il legame con i gruppi tiolici. Recenti studi al microscopio elettronico come quello di Yamanaka, Hara e Kudo, tuttavia, suggeriscono che l’azione antimicrobica avviene all’interno del citoplasma cellulare. L’argento sembra penetrare attraverso i canali ionici senza causare danni alla membrana cellulare. L’argento denatura i ribosomi e sopprime l’espressione di enzimi e proteine essenziali per la produzione di ATP, causando infine la morte cellulare. Nonostante questi studi, ci sono molti rapporti contrastanti sulla potenza dell’argento colloidale. Alcuni studi hanno affermato che l’argento colloidale non possiede alcuna proprietà antimicrobica. In un recente studio di Van Hasselt, Gashe e Ahmad, l’argento colloidale è stato testato contro gruppi simili di organismi utilizzando il test di diffusione (ABAT) e il test di diffusione del disco (Kirby Bauer). Questi test non hanno mostrato alcun effetto sulla crescita degli organismi di prova, suggerendo che l’effetto antimicrobico dell’argento colloidale può essere più mito che fatto. In questo studio, abbiamo cercato di verificare in modo indipendente queste affermazioni.

METODI
Per questo studio è stata usata una soluzione stock di argento colloidale (30 parti per milione, ppm). Questa soluzione stock è stata diluita con acqua sterile per produrre preparazioni di argento colloidale da 20 e 10 ppm. Per preservare l’argento nel suo stato di particolato, questi sono stati conservati in bottiglie sterili, tappate, di colore ambrato, evitando l’esposizione diretta alla luce e alle correnti elettriche. Le soluzioni di argento colloidale sono state testate contro le colture di Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, e Bacillus subtillis usando test di attività antibatterica (ABAT) e diffusione del disco di Kirby Bauer. Per l’ABAT, sei pozzetti sono stati creati usando una sonda di sughero sterile che forava l’agar in modo equidistante l’uno dall’altro. Ogni inoculo batterico è stato tamponato sulla superficie dell’agar. Una goccia di ciascuna delle concentrazioni di argento colloidale (10 ppm, 20 ppm, 30 ppm), antibiotici oftalmici topici tobramicina (Tobrex, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA), lomefloxacina (Okacin, CIBA Vision Ophthalmics, Basilea, Svizzera), moxifloxacina (Vigamox, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA), e ampicillina sono stati successivamente applicati sul pozzetto di agar. L’ampicillina è stata scelta come antibiotico di controllo a causa della suscettibilità degli organismi di prova ad essa. Per la diffusione a dischi di Kirby Bauer, i dischi di sensibilità imbevuti di ogni antimicrobico sono stati posti in modo equidistante sulla piastra di agar, che è stata inoculata con l’organismo in esame. Piastre diverse con diversi organismi di prova sono state incubate per 24 ore a 35° Celsius. La sensibilità ai farmaci è stata successivamente valutata misurando l’area di schiarimento (in millimetri) intorno all’antimicrobico testato o la zona di inibizione (Tabella 1),

Tabella 2. Test di attività antibatterica.

e le misure confrontate con quelle dell’ampicillina per valutare la resistenza o la suscettibilità al farmaco.

RISULTATI
Nessuna attività inibitoria è stata notata per i preparati di argento colloidale a 10, 20 e 30 ppm contro S. aureus, S. epidermidis, B. subtilis ed E. coli su ABAT. Una forte attività inibitoria è stata osservata per la tobramicina, la lomefloxacina e la moxifloxacina, mentre una completa attività inibitoria è stata osservata per l’ampicillina contro gli organismi in esame (Tabella 2). La sensibilità batterica alla preparazione di argento colloidale a 30 ppm è stata dimostrata con il metodo della discdiffusione di Kirby Bauer (Tabella 3). La zona di inibizione della preparazione a 30 ppm contro S. epidermidis era notevolmente più piccola di quella di tobramicina, lomefloxacina, moxifloxacina e ampicillina. La zona di inibizione della preparazione a 30 ppm contro S. aureus era maggiore di quella di tobramicina e ampicillina, ma minore di quella di lomefloxacina e moxifloxacina. La zona di inibizione della preparazione a 30 ppm contro B. subtilis era più piccola di quella di tobramicina, lomefloxacina e moxifloxacina, ma maggiore di quella di ampicillina. Le preparazioni da 10, 20 e 30 ppm di argento colloidale non hanno prodotto zone di inibizione contro E. coli. Gli antibiotici di prova tobramicina, lomefloxacina, moxifloxacina e ampicillina hanno mostrato un’inibizione significativa contro E. coli.

DISCUSSIONE
L’argento colloidale ad una concentrazione di 30 ppm ha dimostrato un’attività inibitoria significativa contro S. epidermidis, S. aureus e B. subtilis con il metodo della diffusione a disco di Kirby Bauer. Questo supporta i risultati di studi precedenti che l’argento inibisce efficacemente la crescita di questi organismi, rendendo l’argento colloidale un efficace antimicrobico.
ABAT, tuttavia, ha dato risultati negativi che possono essere dovuti a condizioni e agenti che influenzano la stabilità dell’argento colloidale. Come raccomandato dal produttore, l’argento colloidale dovrebbe essere conservato in una bottiglia di vetro ambrata e tappata per evitare il contatto diretto con la luce. Il contatto con la plastica innesca anche una reazione ionica, facendo sì che le particelle d’argento inizino a legarsi tra loro invece di essere disperse nel mezzo acquoso. Questo raggruppamento delle particelle d’argento produce una soluzione d’argento colloidale di qualità inferiore, come evidenziato da un cambiamento del suo colore da giallo chiaro a marroncino. In questa condizione, l’azione terapeutica dell’argento colloidale è compromessa. L’osservazione clinica suggerisce che la nostra tecnica di laboratorio può aver contribuito ai risultati negativi nell’ABAT. Nel test di Kirby Bauer a disco-diffusione, la soluzione è stata assorbita dal disco della sensibilità, prolungando così l’azione dell’argento colloidale sulla piastra di agar estendendo il suo tempo di evaporazione in contrasto con l’ABAT, dove la soluzione è stata fatta cadere in un pozzetto sulla piastra di agar. Gli studi futuri dovrebbero, quindi, affrontare i fattori che influenzano la stabilità dell’argento colloidale. In sintesi, questo studio ha dimostrato che i risultati contrastanti per quanto riguarda l’attività antimicrobica dell’argento colloidale possono essere dovuti alle differenze nel disegno dello studio e ai fattori che influenzano la stabilità della soluzione di argento colloidale.


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Riconoscimenti

1. Gli autori ringraziano Vicente O. Santos Jr, MD, direttore medico del Fatima Medical Center, per il suo inestimabile supporto; e Joy Delfin, RMT, della Our Lady of Fatima University, per la sua assistenza nell’esecuzione dei test di laboratorio.

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