Cromatografia líquida com espectrometria de massa tandem (LC-MS-MS) é uma técnica analítica poderosa que combina o poder separador da cromatografia líquida com a capacidade de análise de massa altamente sensível e seletiva da espectrometria de massa tripla quadripolar.
Uma solução de amostra contendo analitos de interesse são bombeados através de uma fase estacionária (coluna LC) por uma fase móvel que flui através de alta pressão. A interação química entre os componentes da amostra, a fase estacionária e a fase móvel afeta diferentes taxas de migração através da coluna LC, afetando uma separação. A grande variedade de combinações de fase estacionária e fase móvel permite a personalização de uma separação para atender muitas soluções complexas.
Após a eluição da coluna LC, o efluente é direcionado para o espectrômetro de massa. O espectrômetro de massa para um sistema LC/MS/MS possui uma fonte de ionização onde o efluente da coluna LC é nebulizado, desolvado e ionizado criando partículas carregadas. Estas partículas carregadas migram então sob alto vácuo através de uma série de analisadores de massa (quadrupole), aplicando campos eletromagnéticos. Um íon precursor de massa/carga específico (ou íon pai) é alvo de passar pelo primeiro quadrupolo, excluindo todas as outras partículas de relação massa/carga. Na célula de colisão, os íons de massa/carga selecionados são então fragmentados em íons de produto (ou íons filhas) por colisão com um gás inerte. O terceiro quadrupolo é utilizado para visar fragmentos de íons de produto específicos. Os íons de produto isolados resultantes são então quantificados com um multiplicador de elétrons. Esta transição de iões do precursor para o ião produto (também referido como MS2) é altamente específica para a estrutura do composto de interesse e, portanto, proporciona um elevado grau de selectividade.
A força desta técnica reside no poder de separação do LC para uma ampla gama de compostos combinados com a capacidade da EM de quantificar compostos com um alto grau de sensibilidade e seletividade com base nas transições únicas de massa/carga (m/z) de cada composto de interesse.
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