Gertrude nähdään ensimmäisen kerran 1. näytöksen 2. kohtauksessa, kun hän yrittää piristää Hamletia isän menetyksestä ja pyytää häntä jäämään kotiin sen sijaan, että hän palaisi kouluun Wittenbergiin. Hänen huolensa jatkuu toisessa näytöksessä, kun hän on kuningas Claudiuksen puolella ja lähettää Rosencrantzin ja Guildensternin piristämään poikaansa. Sen sijaan, että Hamletin äkillinen hulluus johtuisi Ofelian hylkäämisestä (kuten Polonius luulee), hän uskoo syyksi Hamletin isän, kuningas Hamletin kuoleman ja tämän nopean avioliiton Claudiuksen kanssa: ”Epäilen, ettei se ole mikään muu kuin pääasia: hänen isänsä kuolema ja meidän hätäinen avioliittomme.” Kolmannessa näytöksessä Gertrude kuuntelee innokkaasti Rosencrantzin ja Guildensternin kertomusta heidän yrityksestään piristää Hamletia ja tukee kuninkaan ja Poloniuksen suunnitelmaa tarkkailla Hamletia piilossa olevasta näköalapaikasta, kun tämä puhuu Ofelian kanssa, siinä toivossa, että hänen läsnäolonsa parantaisi Hamletia.
Kolmannessa näytöksessä Gertrude kertoo Claudiukselle Poloniuksen murhasta vakuuttuneena siitä, että Hamlet on todella hullu. Hän osoittaa myös aitoa myötätuntoa ja kiintymystä katsellessaan yhdessä muiden kanssa, kun Ofelia laulaa ja toimii täysin hulluna. Ofelian hautajaisissa hän ilmaisee entisen toiveensa siitä, että nuori nainen olisi voinut mennä naimisiin hänen poikansa kanssa: ”Toivoin, että sinusta olisi tullut Hamletini vaimo.” Kun Hamlet ilmestyy ja kamppailee Laertesin kanssa, hän pyytää Hamletia lopettamaan ja pyytää jotakuta pidättelemään häntä – hän sanoo, että Hamlet saattaa olla nyt hulluuden kourissa, mutta se lievittyy pian. Näytelmän alussa Gertrud valehtelee enemmän miehelleen kuin pojalleen; kaappikohtauksen jälkeen koko tilanne kuitenkin vaihtuu.
Loppukohtauksessa Gertrud huomaa, että Hamlet on väsynyt Laertesin kanssa käydyn taistelun aikana, ja tarjoutuu pyyhkimään hänen otsansa. Hän juo vastoin kuninkaan tahtoa kuninkaan Hamletille tarkoitetun myrkkykupin ja kuolee huutaen tuskissaan kaatuessaan:
”Ei, ei, juomaa,-Oi rakas Hamlet-juomaa, juomaa! Olen myrkytetty.”
Muiden hahmojen näkemykset kuningattaresta ovat pääosin kielteisiä. Kun hänen entisen miehensä haamu ilmestyy Hamletille, hän kuvailee häntä ”näennäisen hyveelliseksi kuningattareksi”, mutta käskee Hamletia olemaan kohtaamatta häntä asiasta ja jättämään hänen tuomionsa taivaaseen. Hänen rakkautensa häntä kohtaan eläessään oli kuitenkin hyväntahtoista, sillä Hamlet toteaa, että hänen isänsä olisi pidättänyt elementtejä, jos ne olisivat ”käyneet hänen kasvoillaan liian rajusti”.
Hamlet pitää häntä esimerkkinä naisten heikkoudesta (mikä vaikuttaa hänen suhteeseensa Ofeliaan) ja loukkaantuu jatkuvasti pohdinnoissaan siitä, kuinka nopeasti (alle kuukaudessa) kuningatar avioitui uudelleen.