Gertrudot először az 1. felvonás 2. jelenetében látjuk, amint megpróbálja felvidítani Hamletet apja elvesztése miatt, és könyörög neki, hogy maradjon otthon, ne menjen vissza a wittenbergi iskolába. Aggodalma a második felvonásban is folytatódik, amikor Claudius király pártjára áll, és elküldi Rosencrantzot és Guildensternt, hogy felvidítsák fiát. Továbbá, ahelyett, hogy Hamlet hirtelen őrületét Ophelia elutasításának tulajdonítaná (ahogy Polonius gondolja), inkább apja, Hamlet király halálában és a Claudiusszal kötött gyors, későbbi házasságában látja az okot: “Kételkedem, hogy nem más, mint a fő: apja halála és a mi elhamarkodott házasságunk”. A harmadik felvonásban lelkesen hallgatja Rosencrantz és Guildenstern beszámolóját a fiú felvidítására tett kísérletükről, és támogatja a király és Polonius tervét, hogy egy rejtett kilátóhelyről figyelje Hamletet, amint Opheliával beszélget, abban a reményben, hogy a jelenléte meggyógyítja őt.
A következő felvonásban Gertrúd elmondja Claudiusnak Polonius meggyilkolását, és meggyőződése, hogy Hamlet valóban őrült. Őszinte együttérzésről és szeretetről is tanúbizonyságot tesz, amikor a többiekkel együtt végignézi, ahogy Ophelia teljes őrületében énekel és cselekszik. Ophelia temetésénél kifejezi korábbi reményét, hogy a fiatal nő talán hozzáment volna a fiához: “Reméltem, hogy te lettél volna az én Hamletem felesége”. Amikor Hamlet megjelenik, és megküzd Laertessel, megkéri, hogy hagyja abba, és hogy valaki tartsa vissza – mondván, hogy lehet, hogy most őrültségi rohama van, de ez hamarosan enyhülni fog. A darab elején Gertrúd inkább a férje, mint a fia mellett hazudik, a szekrényjelenet után azonban az egész helyzet megfordul.
A zárójelenetben Gertrúd észreveszi, hogy Hamlet fáradt a Laertesszel való küzdelem során, és felajánlja, hogy megtörli a homlokát. A király akarata ellenére megissza a király által Hamletnek szánt mérget tartalmazó poharat, és meghal, miközben kínjában felkiált, miközben elesik:
“Ne, ne, az italt,-Ó, drága Hamletem- Az italt, az italt! Meg vagyok mérgezve.”
A többi szereplő véleménye a királynőről nagyrészt negatív. Amikor Hamletnek megjelenik egykori férje szelleme, “látszólag erényes királynőnek” írja le, de megparancsolja Hamletnek, hogy ne szálljon vele szembe, és hagyja az égre az ítéletét. Az iránta érzett szeretete azonban, amíg élt, jóindulatú volt, hiszen Hamlet azt állítja, hogy apja visszatartotta volna az elemeket, ha azok “túl durván látogatják arcát”.
Hamlet a nők gyengeségének példáját látja benne (ami kihat az Opheliával való kapcsolatára is), és folyamatosan bántja az a reflexiója, hogy milyen gyorsan (kevesebb mint egy hónap alatt) ment újra férjhez.