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La chromatographie liquide en phase normale (NPLC) est une technique qui utilise des colonnes garnies de phases stationnaires polaires combinées à des phases mobiles non polaires ou modérément polaires pour séparer les composants des mélanges. La vitesse à laquelle les solutés individuels migrent à travers les colonnes NPLC est principalement fonction de leur polarité. Les solutés moins polaires se déplacent le plus rapidement et sortent donc de la colonne et sont détectés en premier, suivis par les solutés de polarité croissante qui se déplacent plus lentement. Cependant, la polarité peut parfois jouer un rôle secondaire par rapport à la capacité d’un soluté à subir une interaction spécifique avec les sites actifs de la surface de la phase stationnaire. L’importance de ces interactions spécifiques entre le soluté et la phase stationnaire dans la NPLC lui confère des avantages uniques par rapport à la technique plus répandue de la chromatographie liquide en phase inverse (RPLC). La RPLC utilise des phases stationnaires non polaires et des phases mobiles polaires à base aqueuse, et l’ordre d’élution des solutés dans un mélange est lié à leur hydrophobie, et non à leur polarité ; les solutés les plus polaires se déplacent le plus rapidement et apparaissent en premier, suivis des solutés de polarité décroissante. La RPLC est utile pour séparer les mélanges dans lesquels les composants diffèrent par leur poids moléculaire et/ou leur solubilité dans l’eau. Cependant, la NPLC est préférable pour de nombreux problèmes de séparation, y compris ceux dans lesquels la solubilité dans l’eau des composés de l’échantillon est limitée. En outre, la NPLC est une meilleure technique pour séparer les composés qui diffèrent par le nombre ou le caractère des groupes fonctionnels et est particulièrement utile pour séparer de nombreux types d’isomères.