Free Press

Az 1900-as évek eleje óta az orvosok a kolloid ezüstöt szájon át, helyileg és intravénásan használják a vírusok, baktériumok és gombák által okozott különböző betegségek kezelésére. Mások “mindent gyógyító” terápiának tekintették. Az ezüst azóta különböző készítményekben áll rendelkezésre, mint például ezüst-nitrát újszülöttkori szemészeti profilaxisra és ezüst-szulfadiazin égési sérülésekre. A hatásosabb antibiotikumok megjelenésével az ezüst kevésbé lett népszerű. Az ezüst krónikus expozíciójának káros hatásait, mint például a szisztémás argyriát és bizonyos mértékig a szem argyrózisát is észlelték. Ennek oka lehet, hogy a rossz minőségű készítmények tovább fokozzák a toxicitást. Az alternatív gyógyászat területén azonban újra fellendülőben van a kolloid ezüst használata. Ma már számos betegségre, köztük kötőhártya-gyulladásra is felírják. A kolloid ezüst oldatban szuszpendált ezüst nanorészecskékből áll. Az ezüstrészecskék olyan aprók, hogy a gravitáció nem hat rájuk, miközben egyenletesen eloszlanak a vízben. Ezért a kiváló minőségű kolloid ezüstkészítményekben nem látható üledék. Az ezüst részecskemérete alapvető fontosságú, ideális esetben 0,05 és 0,01 mikron között van. Az ezüst részecskemérete befolyásolja a szervezetben való felszívódási képességét anélkül, hogy kis dózisban sejtkárosodást okozna az emberi szövetekben. Az egyetlen káros hatás az argyria. A kolloid ezüst, az ezüst biológiailag aktívabb formája könnyen felszívódik a szervezetben.
Az ezüst hatásmechanizmusa a mikrobákra állítólag a sejtmembrán szintjén érvényesül. A membránhoz kötött enzimek, például a légzési láncban részt vevő enzimek működését befolyásolja a tiolcsoportokhoz való kötődés révén. A legújabb elektronmikroszkópos vizsgálatok, például Yamanaka, Hara és Kudo vizsgálatai azonban arra utalnak, hogy az antimikrobiális hatás a sejt citoplazmáján belül jelentkezik. Úgy tűnik, hogy az ezüst áthatol az ioncsatornákon anélkül, hogy sejtmembrán-károsodást okozna. Az ezüst denaturálja a riboszómákat és elnyomja az ATP-termeléshez nélkülözhetetlen enzimek és fehérjék expresszióját, ami végül sejthalált okoz. E vizsgálatok ellenére a kolloid ezüst hatásosságáról számos ellentmondásos jelentés létezik. Egyes tanulmányok azt állították, hogy a kolloid ezüst nem rendelkezik antimikrobiális tulajdonsággal. Van Hasselt, Gashe és Ahmad egy nemrégiben készült tanulmányában a kolloid ezüstöt hasonló organizmuscsoportokkal szemben vizsgálták jól diffúziós (ABAT) és korongdiffúziós teszt (Kirby Bauer) segítségével. Ezek a tesztek nem mutattak ki hatást a vizsgált szervezetek növekedésére, ami arra utal, hogy a kolloid ezüst antimikrobiális hatása inkább mítosz, mint tény. Ebben a vizsgálatban az volt a célunk, hogy függetlenül ellenőrizzük ezeket az állításokat.

MÓDSZEREK
A vizsgálathoz a kolloid ezüst törzsoldatát (30 parts per million, ppm) használtuk. Ezt a törzsoldatot steril vízzel hígítottuk, hogy 20, illetve 10 ppm kolloid ezüstkészítményeket állítsunk elő. Az ezüst szemcsés állapotának megőrzése érdekében ezeket lezárt, steril, borostyánszínű üvegekben tárolták, elkerülve a fénynek és elektromos áramnak való közvetlen kitettséget. A kolloid ezüstoldatokat Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis és Bacillus subtillis kultúrákkal szemben tesztelték antibakteriális aktivitásvizsgálat (ABAT) és Kirby Bauer korongdiffúzió segítségével. Az ABAT-hoz hat lyukat hoztak létre steril parafa fúróval, amely egymástól egyenlő távolságra lévő lyukakat ütött az agarba. Minden egyes baktériuminokulumot az agarfelületre tamponoztunk. Ezt követően a kolloid ezüst (10 ppm, 20 ppm, 30 ppm), a szemészeti helyi antibiotikumok tobramicin (Tobrex, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA), lomefloxacin (Okacin, CIBA Vision Ophthalmics, Basel, Svájc), moxifloxacin (Vigamox, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA) és ampicillin koncentrációiból egy-egy cseppet juttattunk az agargödörre. Az ampicillint választottuk kontroll antibiotikumnak a vizsgált organizmusok erre való érzékenysége miatt. A Kirby Bauer korongdiffúzióhoz az egyes antimikrobiális szerekkel átitatott érzékenységi korongokat egyenlő távolságra helyeztük az agarlemezre, amelyet beoltottunk a tesztorganizmussal. A különböző tesztorganizmusokat tartalmazó különböző lemezeket 24 órán keresztül 35 °C-on inkubálták. A gyógyszerérzékenységet ezt követően a vizsgált antimikrobiális szer körüli tisztulási terület (milliméterben) vagy gátlási zóna (1. táblázat),

2. táblázat. Antibakteriális-aktivitás vizsgálata.

és a méréseket összehasonlítottuk az ampicillinéval, hogy megállapítsuk a hatóanyaggal szembeni rezisztenciát vagy érzékenységet.

eredmények
A 10, 20 és 30 ppm-es kolloid-ezüst készítményeknél nem tapasztaltunk gátló hatást a S. aureus, S. epidermidis, B. subtilis és E. coli ellen az ABAT-on. A tobramicin, a lomefloxacin és a moxifloxacin esetében erős gátló hatást, míg az ampicillin esetében teljes gátló hatást tapasztaltak a vizsgált szervezetekkel szemben (2. táblázat). A baktériumok érzékenységét a 30 ppm-es kolloidezüst-készítménnyel szemben Kirby Bauer korongdiffúziós módszerrel mutatták ki (3. táblázat). A 30 ppm-es készítmény gátlási zónája a S. epidermidis ellen észrevehetően kisebb volt, mint a tobramicin, a lomefloxacin, a moxifloxacin és az ampicilliné. A 30 ppm-es készítmény S. aureus elleni gátlási zónája nagyobb volt, mint a tobramiciné és az ampicilliné, de kisebb, mint a lomefloxaciné és a moxifloxaciné. A 30 ppm-es készítmény B. subtilis elleni gátlási zónája kisebb volt, mint a tobramiciné, a lomefloxaciné és a moxifloxaciné, de nagyobb, mint az ampicilliné. A kolloid ezüst 10, 20 és 30 ppm-es készítményei nem mutattak gátlási zónát E. coli ellen. A teszt antibiotikumok, a tobramicin, a lomefloxacin, a moxifloxacin és az ampicillin jelentős gátlást mutattak az E. coli ellen.

Megbeszélés
A kolloid ezüst 30 ppm koncentrációban jelentős gátló hatást mutatott a S. epidermidis, a S. aureus és a B. subtilis ellen a Kirby Bauer korong-diffúziós módszerrel. Ez alátámasztja a korábbi vizsgálatok megállapításait, miszerint az ezüst hatékonyan gátolja ezen organizmusok növekedését, ami a kolloid ezüstöt hatékony antimikrobiális szerré teszi.
AABAT azonban negatív eredményeket hozott, ami a kolloid ezüst stabilitását befolyásoló körülményeknek és szereknek tudható be. A gyártó ajánlása szerint a kolloid ezüstöt egy kupakkal lezárt, borostyánszínű üvegben kell tárolni, hogy megakadályozzák a fény közvetlen érintkezését. A műanyaggal való érintkezés ionos reakciót is kivált, amelynek hatására az ezüst részecskéi elkezdenek egymáshoz kötődni ahelyett, hogy a vizes közegben eloszlanának. Az ezüstrészecskéknek ez az összecsapódása rosszabb minőségű kolloid ezüstoldatot eredményez, amit a színének világossárgáról barnássá válása jelez. Ebben az állapotban a kolloid ezüst terápiás hatása sérül. A klinikai megfigyelés azt sugallja, hogy laboratóriumi technikánk hozzájárulhatott az ABAT negatív eredményeihez. A Kirby Bauer korong-diffúziós tesztben az oldatot az érzékenységi korong felszívta, ezáltal meghosszabbítva a kolloid ezüst hatását az agarlemezre a párolgási idő meghosszabbításával, ellentétben az ABAT-tal, ahol az oldatot az agarlemezen lévő mélyedésbe cseppentették. A jövőbeni vizsgálatoknak ezért foglalkozniuk kell a kolloid ezüst stabilitását befolyásoló tényezőkkel. Összefoglalva, ez a vizsgálat azt mutatta, hogy a kolloid ezüst antimikrobiális aktivitásával kapcsolatos ellentmondásos eredmények a vizsgálati terv és a kolloid ezüstoldat stabilitását befolyásoló tényezők közötti különbségeknek tudhatók be.

Acknowledgement

1. A szerzők köszönetet mondanak Dr. Vicente O. Santos Jr-nak, a Fatima Medical Center orvosigazgatójának a felbecsülhetetlen értékű támogatásáért; és Joy Delfin RMT-nek, a Fatima-i Miasszonyunk Egyetem munkatársának a laboratóriumi vizsgálatok elvégzésében nyújtott segítségéért.