By Leave a Comment on 高速液体クロマトグラフィー（HPLC） – 方法、利点とアプリケーション
  • By G.P. ThomasApr 15 2013

    画像クレジット： khawfangenvi16/.com

    高性能液体クロマトグラフィーまたは高圧液体クロマトグラフィー（HPLC）は、分析化学および生化学において化合物の混合物を分離し、混合物の個々の成分を特定、定量または精製するために用いられるクロマトグラフィー法です。

    逆相HPLCまたは超高性能液体クロマトグラフィー（UHPLC）は一般的に使用される分離モードです。 疎水性および有機性機能を持つ化合物を動的に保持することができる。

    HPLCのしくみ

    分離・検査するサンプル混合物は、ごく少量、カラムを通過する移動相の流れに送られます。

    混合物はさまざまな速度でカラム内を移動し、固定相として知られる吸着剤と相互作用します。 混合物中の各成分の速度は、1）その化学的性質、2）カラムの性質、3）移動相の組成に依存します。 特定の分析対象物がカラムから出現する時間を保持時間と呼ぶ。 保持時間は特定の条件下で測定され、特定の分析物の識別特性とみなされます。

    吸着剤粒子は疎水性または極性の性質を持つ場合があります。 一般的に使用される移動相は、水とアセトニトリルやメタノールなどの有機溶媒の混和性のある組み合わせが含まれる。

    移動相の水性成分は、試料成分の分離を可能にするために、ギ酸、リン酸、トリフルオロ酢酸などの酸またはその塩を含む場合があります。 移動相の組成は、クロマトグラフィー分析中に一定に保たれるか、または変化させられるかのいずれかである。 一定にする方法は、固定相に対する親和性があまり異ならない試料成分を分離する場合に有効である。 変化させた場合は、溶出強度の低いものから高いものまで移動相の組成を変化させます。 移動相の溶出強度は分析物の保持時間に反映され、高い溶出強度は速い溶出をもたらします。

    移動相の組成は、複数のサンプル成分と固定相の間の相互作用の強さに基づいて選択します。

    HPLC分割プロセスは、液体-液体抽出プロセスとよく似ています。ただし前者は連続プロセスですが、後者はステップワイズのプロセスである点が異なります。

    HPLCシステムのメーカー

    今日の市場には、さまざまなHPLCオプションがあります。 以下は、さまざまなHPLCシステムメーカーのリストとその製品の簡単な紹介です。

    • クロマトグラフィーの科学に基づく会社であるDionexは、UltiMate® 3000 Rapid Separation LCシステム、UltiMate 3000 RSLCnanoシステム、ユニバーサル荷電エアロゾル検出器のCorona®ファミリを製造しています。
    • Jasco Analytical Instrumentsでは一連のHPLCシステムを提供しています。 LC-2000 PlusシリーズHPLCシステムは、ユニークな構成が可能です。 高性能で低価格なこれらのHPLCシステムは、シンプルなアイソクラティックQAから高度なマルチソルベント/マルチカラム分析法開発まで、事実上あらゆる要件に適合させることが可能です。 アイソクラティックLC-2000plus-Isoは、ポンプ、デガッサー、オートサンプラー、UV/Vis検出器を備えています。 ポンプは1µLから10mL/minの流速で、最大500barの圧力で、2、3、4、6および最大10mmの内径のカラムに使用できるように設計されています。 バイナリグラジェントLC-2000plus-HPGは、アイソクラティックシステムに似ていますが、2溶媒グラジェントポンプの構成を備えています。 ポンプの流量は1mmカラムに対応しています。 Quaternary Gradient LC-2000plus-LPGもアイソクラティックシステムと同様ですが、このモデルは溶媒の柔軟性を最大限に高めるために4液グラジエントポンプ構成を備えています。
    • Gilsonの分取HPLCシステムは、セミ分取および分取分離の両方に適応できる広い流量レンジを備えています。 その高い送液力により、幅広い分取カラムサイズに対応します。
    • Sharp HPLC Systems from AAPPTecは、マイクロプロセッサ制御のポンプを備えており、高精度で正確な流量を実現し、優れた分析再現性と最高の測定精度を得ることに貢献します。

      HPLCの利点

      HPLCシステムの主な利点は次のとおりです。

      • クロマトグラフィー装置の制御と自動化
      • データ管理、セキュリティ機能、レポートおよび装置のバリデーションを提供します。
      • パワフルで適応性が高い
      • 試料から装置、分離から結果の報告まで、分析のすべての領域を管理することで生産性を向上
      • 手頃な価格

      HPLCのアプリケーション

      HPLC技術の主目的は特定の分析物または化合物を特定、定量および精製することにあります。 定量分析と定性分析の両方が可能です。 HPLCは次のような用途に使用できる。

      • 水の精製
      • 製薬産業における不純物の検出
      • 微量成分の前濃縮
      • リガンド交換クロマトグラフィー
      • タンパク質のイオン交換クロマトグラフィー
      • 高pHアニオン-交換クロマトグラフィー
      • 高pHアニオン-交換クロマトグラフィー

      出典および参考文献

      • 反転相HPLC/UHPLCクロマトグラフィーPhenomenex
      • Dionex Products-Dionex
      • HPLC Systems-aapptec
      • Preparative HPLC System-Gilson

      この記事は4月22日に更新された記事です。 2019.

      執筆：

      G.P. Thomas

      ゲーリーはマンチェスター大学で地球化学の一級優等学位を取得し、地球科学の修士号を取得した後、卒業した。 オーストラリアの鉱業界で働いた後、地質学のブーツを脱いで執筆活動に専念することにしました。 話題性のある有益なコンテンツを開発していないときは、ゲイリーは通常、愛用のギターを弾いたり、アストンビラFCが勝利の顎から敗北を奪い取るのを見たりしている。

      引用

      エッセイ、論文、レポートでこの記事を引用するには、以下の形式のいずれかを使用してください：

      • APA

        トーマス、G. (2019, 8月 15日)の論文です。 高速液体クロマトグラフィー（HPLC）-方法、利点、応用． AZoM. 2021年3月24日にhttps://www.azom.com/article.aspx?ArticleID=8468.

      • MLA

        Thomas, G.P. から取得した。 “高速液体クロマトグラフィー（HPLC）-メソッド、利点とアプリケーション”. AZoM. 2021年3月24日. <https://www.azom.com/article.aspx?ArticleID=8468>.

      • シカゴ

        Thomas, G.P.. “高速液体クロマトグラフィー（HPLC）-メソッド、利点とアプリケーション”. AZoM. https://www.azom.com/article.aspx?ArticleID=8468. (2021年3月24日アクセス).

      • Harvard

        Thomas, G.P.. 2019. 高速液体クロマトグラフィー（HPLC）-メソッド、メリット、アプリケーション. AZoM, 2021年3月24日閲覧, https://www.azom.com/article.aspx?ArticleID=8468.

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