SIDEN begyndelsen af 1900-tallet har læger anvendt kolloid sølv oralt, topisk og intravenøst til behandling af forskellige tilstande forårsaget af virus, bakterier og svampe. Det er blevet betragtet som en “helbredende behandling” af andre. Sølv har siden da været tilgængeligt i forskellige præparater som f.eks. sølvnitrat til profylakse af neonatal oftalmia og sølvsulfadiazin til behandling af brandsår. Med fremkomsten af mere potente antibiotika blev sølv mindre populært. Der er også konstateret negative virkninger af kronisk eksponering for sølv, som f.eks. systemisk argyrium og i et vist omfang øjenargyrosis. Dette kan skyldes, at præparater af ringere kvalitet bidrager yderligere til toksiciteten. Inden for alternativ medicin er der imidlertid en genopblomstring af brugen af kolloidalt sølv. Det bliver nu ordineret til mange sygdomme, herunder konjunktivitis. Kolloidalt sølv består af nanopartikler af sølv, der er suspenderet i en opløsning. Sølvpartiklerne er så små, at de ikke påvirkes af tyngdekraften, mens de er jævnt fordelt i vand. Derfor ses der ingen sedimenter i kolloidal sølvpræparater af høj kvalitet. Partikelstørrelsen af sølv er afgørende og ligger ideelt set mellem 0,05 og 0,01 mikron. Sølvets partikelstørrelse påvirker dets evne til at blive absorberet af kroppen uden at forårsage celleskader på det menneskelige væv ved lave doser. Den eneste negative virkning er argyrium. Kolloid sølv, den mere biologisk aktive form af sølv, optages let af kroppen.
Sølvets virkningsmekanisme på mikrober siges at være på cellemembranniveau. Det påvirker funktionen af membranbundne enzymer, som f.eks. dem, der er involveret i respirationskæden, gennem binding med thiolgrupperne. Nylige elektronmikroskopiske undersøgelser, f.eks. af Yamanaka, Hara og Kudo, tyder imidlertid på, at den antimikrobielle virkning sker i cellecytoplasmaet. Sølv synes at trænge igennem ionkanalerne uden at forårsage skader på cellemembranen. Sølv denaturerer ribosomerne og undertrykker ekspressionen af enzymer og proteiner, der er afgørende for ATP-produktionen, hvilket i sidste ende forårsager celledød. På trods af disse undersøgelser er der mange modstridende rapporter om virkningen af kolloidalt sølv. Nogle undersøgelser hævder, at kolloidalt sølv ikke har nogen antimikrobielle egenskaber. I en nyere undersøgelse foretaget af Van Hasselt, Gashe og Ahmad blev kolloid sølv testet mod lignende grupper af organismer ved hjælp af brønddiffusionstest (ABAT) og diskdiffusionstest (Kirby Bauer). Disse test viste ingen effekt på væksten af testorganismerne, hvilket tyder på, at den antimikrobielle virkning af kolloid sølv måske mere er en myte end en kendsgerning. I denne undersøgelse havde vi til formål at verificere disse påstande uafhængigt.
METHODER
Der blev anvendt en stamopløsning af kolloid sølv (30 dele pr. million, ppm) til denne undersøgelse. Denne stamopløsning blev fortyndet med sterilt vand for at fremstille kolloid sølvpræparater med 20 og 10 ppm kolloid sølv. For at bevare sølvet i partikulær form blev disse opbevaret i lukkede, sterile, ravfarvede flasker, idet direkte eksponering for lys og elektrisk strøm blev undgået. De kolloidale sølvopløsninger blev testet mod kulturer af Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis og Bacillus subtillis ved hjælp af antibakteriel aktivitetstest (ABAT) og Kirby Bauer disc diffusion. Til ABAT blev der lavet seks brønde ved hjælp af en steril korkborer, hvor der blev slået huller i agaren i lige store afstande fra hinanden. Hvert bakterieinoculum blev svabbet ud over agaroverfladen. Derefter blev der påført en dråbe af hver af koncentrationerne af kolloid sølv (10 ppm, 20 ppm, 30 ppm), oftalmiske topiske antibiotika tobramycin (Tobrex, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA), lomefloxacin (Okacin, CIBA Vision Ophthalmics, Basel, Schweiz), moxifloxacin (Vigamox, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA) og ampicillin på agarbrønden. Ampicillin blev valgt som kontrolantibiotikum på grund af testorganismernes følsomhed over for dette antibiotikum. Til Kirby Bauer-skivediffusion blev følsomhedsskiver, der var gennemvædet med hvert antimikrobielt middel, anbragt i lige stor afstand på agarpladen, som blev inokuleret med testorganismen. Forskellige plader med forskellige testorganismer blev inkuberet i 24 timer ved 35° Celsius. Lægemiddelfølsomheden blev efterfølgende vurderet ved at måle det område, hvor der var klarhed (i millimeter) omkring det testede antimikrobielle stof eller hæmningszonen (tabel 1),
Tabel 2. Test af antibakteriel aktivitet.
og målingerne sammenlignes med målingerne for ampicillin for at vurdere resistens eller modtagelighed over for stoffet.
RESULTATER
Der blev ikke konstateret nogen hæmmende aktivitet for 10-, 20- og 30-ppm kolloid-sølvpræparaterne mod S. aureus, S. epidermidis, B. subtilis og E. coli på ABAT. Der blev konstateret stærk hæmmende aktivitet for tobramycin, lomefloxacin og moxifloxacin, mens der blev konstateret fuldstændig hæmmende aktivitet for ampicillin over for testorganismerne (tabel 2). Bakteriernes følsomhed over for 30 ppm kolloidalt sølvpræparat blev påvist ved Kirby Bauer-discdiffusionsmetoden (tabel 3). Hæmningszonen for 30-ppm-præparatet mod S. epidermidis var markant mindre end for tobramycin, lomefloxacin, moxifloxacin og ampicillin. Hæmningszonen for 30 ppm-præparatet mod S. aureus var større end for tobramycin og ampicillin, men mindre end for lomefloxacin og moxifloxacin. Hæmningszonen for 30-ppm-præparatet mod B. subtilis var mindre end for tobramycin, lomefloxacin og moxifloxacin, men større end for ampicillin. 10-, 20- og 30 ppm-præparaterne af kolloid sølv gav ingen hæmningszoner mod E. coli. Testantibiotikaene tobramycin, lomefloxacin, moxifloxacin og ampicillin viste signifikant hæmning mod E. coli.
DISCUSSION
Kolloidalt sølv i en koncentration på 30 ppm viste signifikant hæmmende aktivitet mod S. epidermidis, S. aureus og B. subtilis på Kirby Bauer disk-diffusionsmetoden. Dette understøtter resultaterne i tidligere undersøgelser, at sølv effektivt hæmmer væksten af disse organismer, hvilket gør kolloid sølv til et effektivt antimikrobielt middel.
ABAT gav dog negative resultater, hvilket kan skyldes forhold og agenser, der påvirker stabiliteten af kolloid sølv. Som anbefalet af producenten bør kolloidalt sølv opbevares i en lukket, ravfarvet glasflaske for at undgå direkte kontakt med lys. Kontakt med plastik udløser også en ionisk reaktion, hvilket får sølvpartikler til at begynde at binde sig til hinanden i stedet for at blive spredt i det vandige medium. Denne sammenklumpning af sølvpartiklerne giver en kolloidal sølvopløsning af ringere kvalitet, hvilket fremgår af en ændring i farven fra lysegul til brunlig. I denne tilstand er den terapeutiske virkning af kolloidalt sølv kompromitteret. Kliniske observationer tyder på, at vores laboratorieteknik kan have bidraget til de negative resultater i ABAT. I Kirby Bauer disc-diffusionstesten blev opløsningen absorberet af følsomhedsskiven, hvilket forlængede det kolloidale sølvs virkning på agarpladen ved at forlænge fordampningstiden i modsætning til ABAT, hvor opløsningen blev dryppet i et hul på agarpladen. Fremtidige undersøgelser bør derfor tage fat på de faktorer, der påvirker stabiliteten af kolloid sølv. Sammenfattende viste denne undersøgelse, at de modstridende resultater vedrørende den antimikrobielle aktivitet af kolloid sølv kan skyldes forskelle i undersøgelsesdesignet og faktorer, der påvirker stabiliteten af den kolloide sølvopløsning.
1. Wadhera A, Fung M. Systemisk argyria i forbindelse med indtagelse af kolloidalt sølv. Dermatol Online J 2005; 11: 12-20.
2. Dean W, Mitchell M, Lugo VW, South J. Reduktion af viral belastning hos AIDS-patienter med intravenøst mildt sølvprotein. Clin Pract Alt Med 2001; 2: 48-53.
3. Brandt D, Park B, Hoang M, Jacobe HT. Argyria sekundært til indtagelse af hjemmelavet sølvopløsning. J Acad Dermatol 2005; 53: S105-S107.
4. Percival SL, Bowler PG, Russell D. Bakteriernes resistens over for sølv i forbindelse med sårpleje. J Hosp Infect 2005; 60: 1-7.
5. Lansdown AB, Sampson B, Laupattarakasem P, Vuttivirojana A. Silver aids healing in the sterile skin wound. Br J Dermatol 1997; 137: 728-735.
6. Katzung BG, et al. Basic in Clinical Pharmacology 6th edition: Desinfektionsmidler og antiseptika. 1995; Chapter 51, p749.
7. Walker M, Cochrane CA, Bowler PG, et al. Silver deposition and tissue staining associated with wound dressings containing silver. Ostomy Wound Manage 2006; 52: 42-50.
8. Yamanaka M, Hara K, Kudo J. Applied Environmental Microbiology: 2005 Nov; Bactericidal actions of a Silver Ion solution on Escherichia Coli, studied by energyfiltering Transmission Electron Microscopy and Proteomic Analysis. 71(11): p7589- 93.
9. Van Hasselt P, Gashe BA, Ahmad J. Colloidal silver as an antimicrobial: fact or fiction. J Wound Care 2004; 13: 154-155.
Acknowledgment
1. Forfatterne takker Vicente O. Santos Jr., MD, medicinsk direktør for Fatima Medical Center, for hans uvurderlige støtte; og Joy Delfin, RMT, fra Our Lady of Fatima University, for hendes hjælp til at udføre laboratorieprøverne.