Gertrude é vista pela primeira vez no Acto 1 Cena 2 enquanto ela tenta animar Hamlet pela perda do pai, implorando-lhe que fique em casa em vez de voltar para a escola em Wittenberg. Sua preocupação com ele continua no segundo ato, ao lado do Rei Cláudio, enviando Rosencrantz e Guildenstern para levantar os espíritos de seu filho. Além disso, em vez de atribuir a súbita loucura de Hamlet à rejeição de Ofélia (como pensou Polônio), ela acredita que a causa seja o pai dele, a morte do rei Hamlet e seu rápido e subseqüente casamento com Cláudio: “Duvido que não seja outra senão a principal; a morte do seu pai e o nosso casamento rápido.” No terceiro ato, ela escuta avidamente o relato de Rosencrantz e Guildenstern sobre sua tentativa de aplaudi-lo, e apoia o plano do rei e de Polônio de observar Hamlet de um ponto de vista oculto enquanto ele fala com Ofélia, com a esperança de que sua presença o cure.
No próximo ato, Gertrudes conta a Cláudio o assassinato de Polônio, convencida de que Hamlet está verdadeiramente louco. Ela também demonstra verdadeira compaixão e carinho enquanto observa, junto com outros, como Ofélia canta e age em absoluta loucura. No enterro de Ofélia, ela expressa sua antiga esperança de que a jovem mulher pudesse ter casado com seu filho: “Eu esperava que tivesses sido a mulher do meu Hamlet.” Quando Hamlet aparece e luta com Laertes, ela pede que ele pare e que alguém o detenha – dizendo que ele pode estar em um ataque de loucura agora, mas isso vai aliviar em breve. No início da peça, Gertrude deita-se mais com o marido do que com o filho, mas depois da cena do armário toda a situação é trocada.
Na cena final, Gertrude nota que Hamlet está cansado durante a luta com Laertes, e se oferece para limpar a testa. Ela bebe um copo de veneno destinado a Hamlet pelo Rei, contra a vontade do Rei, e morre, gritando em agonia enquanto cai:
“Não, não, a bebida,-O meu querido Hamlet-A bebida, a bebida! Eu estou envenenado:
As opiniões de outros personagens sobre a Rainha são em grande parte negativas. Quando o fantasma de seu ex-marido aparece a Hamlet, ele a descreve como uma “rainha aparentemente virtuosa”, mas ordena que Hamlet não a confronte sobre isso e deixe seu julgamento para o céu. No entanto, seu amor por ela enquanto vivia era benevolente, pois Hamlet afirma que seu pai teria retido os elementos se eles “visitassem seu rosto com demasiada aspereza”.
Hamlet a vê como um exemplo da fraqueza das mulheres (que afeta sua relação com Ofélia) e constantemente ferida em seus reflexos de quão rapidamente (menos de um mês) ela se casou novamente.