Krevní skupiny jsou klasifikace dědičných druhově specifických antigenů na povrchu červených krvinek. U psů je rozpoznáno sedm krevních typů a u koček čtyři krevní typy. Tyto antigeny mohou sdílet i další buňky, jako jsou leukocyty, krevní destičky nebo buňky v jiných tkáních. Alo-protilátky (nebo izo-protilátky) jsou protilátky přítomné v séru proti antigenu jiného zvířete stejného druhu. Mohou být přirozeně získané (např. požitím mleziva) nebo vyvolané předchozí expozicí (např. transfuzí) a jejich přítomnost se zjišťuje křížovou zkouškou.
Transfuze krevních produktů může u veterinárních pacientů vyvolat celou řadu škodlivých účinků. Některé z těchto účinků jsou běžné a mohou být nevyhnutelné (např. horečka), ale jiné, jako jsou imunitně zprostředkované akutní a opožděné transfuzní reakce, které jsou přímo spojeny s nevhodným typem a křížovým procesem u psů a koček, lze minimalizovat.
V tomto článku uvádím přehled typizace krve u psů a koček a správné techniky křížové transfuze. Nabízím také doporučení pro rozhodování veterinárních lékařů, která pomohou předejít transfuzním reakcím, a zabývám se příznaky, které lze pozorovat, pokud k reakci dojde.
KREVNÍ TYPY PSŮ A ANTIBODY
Krevní typy psů jsou číslovány podle systému psích erytrocytárních antigenů (DEA).
DEA 1.1, 1.2 a 1.3
DEA 1 byl dříve známý jako A a skládá se ze čtyř alel: negativní, 1.1, 1.2 a 1.3.
DEA 1 se skládá ze čtyř alel: negativní, 1.1, 1.2 a 1.3. DEA 1.1 se dědí jako autozomálně dominantní znak oproti DEA 1.2 a nulový typ je recesivní vůči oběma. DEA 1.1 a DEA 1.2 jsou nejdůležitější antigeny a společně se vyskytují asi u 60 % psů.1 Může dojít ke zmatku, protože oba tyto typy byly považovány za A pozitivní; nicméně u psů s DEA 1.2, kteří tvoří 7 až 29 % psů, se po transfuzi s buňkami DEA 1.1 vytvoří silné anti-DEA 1.1 protilátky.
Ačkoli se přirozeně se vyskytující protilátky proti těmto antigenům obecně považují za neexistující, první transfuze s krví DEA 1.1 mohou být spojeny se sníženou životností cirkulujících transfundovaných buněk a následné transfuze budou spojeny s akutní hemolytickou reakcí. Transfuze krve s DEA 1.2 senzibilizovanému DEA negativnímu psovi bude mít za následek exponenciální ztrátu buněk v průběhu několika týdnů, přičemž přibližně polovina transfundovaných buněk bude ztracena během prvních 10 dnů.2 DEA 1.3 je známa pouze u psů z Austrálie, především u německých ovčáků.3
DEA 4
DEA 4 se vyskytuje až u 98 % psů a psi pouze s tímto typem jsou považováni za univerzální dárce. Pouze asi 75 % dobrmanských pinčů je DEA 4 pozitivních. Není známo, že by se přirozeně vyskytovaly protilátky proti DEA 4, nicméně po senzibilizaci krevní transfuzí s pozitivním DEA 4 se mohou vyskytnout hemolytické transfuzní reakce u psů, kteří tento antigen nemají.4
DEA 3 a 5
DEA 3 a 5 jsou vyjádřeny v menším podílu psí populace, ale DEA 3 se vyskytuje u 23 % chrtů a 30 % chrtů je DEA 5 pozitivních. Přirozeně se vyskytující protilátky jsou přítomny u 20 % DEA 3 negativních psů a 10 % DEA 5 negativních psů ve Spojených státech.2
DEA 7
DEA 7 se vyskytuje u 8 až 45 % psů v USA. Byly pozorovány přirozeně se vyskytující protilátky proti DEA 7, přičemž opožděná transfuzní reakce způsobuje zkrácení životnosti transfundovaných buněk, ale nedochází k hemolýze.5,6 Ačkoli existují kontroverze ohledně významu tohoto antigenu, je nejlepší zabránit předčasné ztrátě transfundovaných buněk použitím dárcovské krve, ve které tento antigen chybí.
Dal antigen
V roce 2007 byl hlášen nový antigen, který byl zjištěn u přibližně 93 % psů v USA.7 Byl dočasně pojmenován Dal, protože indexový případ se týkal dalmatina. Dalmatin byl typizován jako DEA 1.1, 3, 4 a 5 pozitivní a DEA 7 negativní, ale stal se senzibilizovaným po opakovaných transfuzích pro chronické selhání ledvin s krví typizovanou pouze jako DEA 1.1, 4 pozitivní. Protože byly nutné další transfuze, bylo nutné provést test kompatibility. Hlavní křížové shody mezi indexovým psem a 55 nedalmatinskými dárci, kteří měli být kompatibilní na základě typů DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5 a 7, byly inkompatibilní. Hlavní křížové shody mezi indexovým psem a pouze 20 z 25 (80 %) nepříbuzných dalmatinů byly kompatibilní. Nekompatibilní transfuze zahrnující tento antigen by mohly vést k akutním a opožděným hemolytickým reakcím. Pokud bude nutné provést transfuzi u senzibilizovaných dalmatinů, zdá se, že kompatibilní dárci budou s největší pravděpodobností nalezeni v rámci plemene dalmatinů.
Další antigeny
O DEA 6 a 8 a o dalších 11 předpokládaných antigenech je známo jen málo, protože typizační séra pro tyto antigeny nejsou k dispozici. Bez typizace sér pro tyto antigeny nelze určit jejich vztah k Dal.
TIPY A ANTIBODY V KOCOURKOVÉ KRVI
U koček byl rutinně rozpoznán pouze systém AB, který se skládá ze tří typů: A, B a AB.
Typ A je nejběžnější a vyskytuje se u více než 95 % domácích krátkosrstých a dlouhosrstých koček ve Spojených státech. Dosud byly jako typ A identifikovány všechny siamské, barmské, tonkinské, ruské modré, americké krátkosrsté a orientální krátkosrsté kočky.8-10 Typ B byl identifikován až u 10 % mainských mývalích a norských lesních koček, až u 20 % habešských, birmánských, perských, somálských, sfinxových a skotských fold koček a až u 45 % exotických a britských krátkosrstých koček, cornish rex a devon rex. Typ AB byl pozorován u domácích krátkosrstých koček i u plemen s typem B.11
Tento krevní systém se řídí jednoduchou mendelovskou dědičností, přičemž gen A (A) má dominanci nad genem AB (ab), který má dominanci nad genem B (b). Kočky typu A mohou mít kterýkoli ze tří genotypů: A-A, A-ab nebo A-b. Kočky typu AB mohou mít genotyp ab-ab nebo ab-b a kočka typu B může mít pouze genotyp b-b. Chovný pár koček typu A tedy může mít koťata typu A, AB nebo B, v závislosti na jejich fenotypech.
Na rozdíl od psů mají kočky výrazné přirozeně se vyskytující protilátky. Všechna koťata typu B si vytvoří protilátky během několika týdnů po narození a vysoké titry se vyvinou do tří měsíců věku.12 V důsledku toho budou mít matky typu B silné anti-A protilátky v mlezivu bez předchozí expozice z březosti nebo transfuze. U koťat typu A se také vytvoří protilátky, ale ty jsou obecně považovány za méně silné. Vzhledem k tomu, že se protilátky mohou přenášet na kotě prostřednictvím mleziva až 16 hodin po narození, mohou koťata narozená jako zdravá náhle ochabnout na následky vzniklé hemolytické anémie. Tato hemolytická anémie se obvykle vyskytuje u koťat typu A nebo AB narozených matkám typu B spářeným s matkami typu A.13
Kočky typu AB jsou považovány za univerzální příjemce, protože postrádají protilátky anti-A a anti-B; měly by však být transfundovány buňkami typu A, aby nedošlo k neúmyslné transfuzi silných protilátek anti-A od dárce typu B, což je příklad menší vedlejší reakce. Vzhledem k vlivu geografické polohy a plemene na četnost krevních skupin může být riziko vyvolání potenciálně smrtelné transfuzní reakce u příjemců typu B při transfúzi neshodné krve až 20 %.
Mik antigen
V roce 2007 byl zaznamenán nový antigen Mik, který je přítomen u mnoha domácích krátkosrstých koček.14 U koček, které tento antigen postrádají (asi 6 % testovaných), může po transfuzi shodné krve AB dojít k akutní hemolytické reakci. Vzhledem k tomu, že typizace séra pro antigen Mik není k dispozici a protilátky se zřejmě vyskytují přirozeně, je vhodné před transfuzí provést křížovou zkoušku i u typově shodných koček.
TIPOVÁNÍ A KŘIŽOVÁNÍ KRVE
K typování a křížovému porovnávání se doporučuje čerstvě odebraná krev v EDTA a sraženina nebo hladká zkumavka od příjemce i dárce, pokud dárce nebyl předtím vyšetřen na protilátky, v takovém případě jsou potřeba pouze dárcovské buňky ze vzorku EDTA. Alternativně lze použít segmenty zkumavky („pigtails“) (obrázek 1) z jednotky dárce, pokud zůstane zachována sterilita jednotky. Vzorky by měly být bez hemolýzy a lipémie.
Obrázek 1. „Pigtails“ z dárcovské jednotky mohou být použity k určení krevní skupiny a ke křížovému porovnání s příjemcem, pokud sterilita jednotky zůstane neporušena. (Foto Charlie Kerlee.)
Komerční soupravy pro určování krevní skupiny jsou k dispozici pro psy a kočky a lze je použít k vyšetření potenciálních dárců a k vhodnému výběru pro křížovou zkoušku a transfuzi na základě krevní skupiny příjemce. Příkladem jsou typizační karty (DMS Laboratories) a imunochromatografická kazeta (Alvedia) (tabulka 1). Tyto soupravy typizují pouze DEA 1.1 u psů a A, B a AB u koček. Jak karty, tak kazety jsou relativně jednoduché metody typizace, které vyžadují pouze několik minut a obsahují prostředky pro provedení automatické kontroly k identifikaci možných interferencí způsobených autoaglutinací. Při použití aglutinační koncové reakce 2+ pro karty byly v jedné studii získány tři falešně negativní a pět falešně pozitivních reakcí z 88 testovaných vzorků psů.15 Tento problém byl údajně odstraněn.16 Ve stejné studii nebyly u kazety získány žádné falešně negativní a šest falešně pozitivních výsledků. Difuzní test na gelovém sloupci (DiaMed) použitý v této studii již není na veterinárním trhu k dispozici.
Tabulka 1: Vybrané webové stránky o typizaci krve a krevních přípravcích
Při nedodržení pokynů k soupravě lze získat chybné výsledky. Autoaglutinace a křížová kontaminace z dříve použitých míchacích tyčinek může způsobit falešně pozitivní výsledky u metod typizace na kartě. Falešně negativní výsledky lze získat u krve extrémně anemických zvířat (PCV < 10 %) a při prozonální reakci (nadbytek protilátek vzhledem k množství přítomného antigenu).17
Nedávná studie naznačuje, že může být k dispozici důkladnější, rozšířená typizační souprava, která bude typizovat pro DEA 1.1, 3, 4 a 7 a Dal.18 Vhodné ředění pro typizační činidlo DEA 1.2 nebylo zjištěno a DEA 5 nebyla zahrnuta. V této studii dostalo 10 psů transfuze kompatibilní s DEA 1.1 a před transfuzí a po ní byli křížově testováni. Na základě výsledků typizace se u šesti zkřížených párů u čtyř psů mohly vytvořit protilátky a čtyři zkřížené páry zahrnující dva psy se staly inkompatibilními o 21 až 23 dní později se silou reakce v rozmezí 3+ až 4+. Třetí pes měl ve 13. dni inkompatibilitu 1+, která se stala kompatibilní do 50. dne. U pěti zkřížených párů u čtyř psů se na základě rozšířených výsledků typizace neočekával vznik protilátek, nicméně v průběhu dvou až čtyř týdnů byly získány významné výsledky inkompatibilních zkřížených párů o síle reakce od 1+ do 3+. Tyto neslučitelné výsledky naznačují senzibilizaci na antigeny, které nebyly typizací zjištěny (např. DEA 5, 6, 8).
Přestože jsou tyto metody typizace relativně jednoduché, přečtěte si důkladně příbalové letáky, kde jsou uvedeny zdroje potenciálně chybných výsledků, a postupujte přesně podle pokynů. Pokud je nutné konfirmační testování, například pro výběr stálých dárců, pro kontrolu sporných výsledků nebo namísto vlastní typizace pro plánované operace, lze využít externí laboratoře, například Animal Blood Resources International ve Stockbridge ve státě Michigany nebo Hematologickou a transfuzní laboratoř Pensylvánské univerzity. Možnost rozšířené soupravy pro typizaci krve může tyto možnosti rozšířit na další testovací pracoviště.
Hlavní křížová zkouška testuje detekovatelné přirozeně se vyskytující nebo indukované protilátky v séru příjemce proti erytrocytům dárce. Toto vyšetření by mělo být provedeno vždy, když je pravděpodobné, že pacient má příslušné přirozeně se vyskytující protilátky (kočky), pokud není známa transfuzní anamnéza pacienta nebo pokud k transfuzi došlo nejméně před dvěma až čtyřmi dny, a to i v případě, že byla provedena se stejným dárcem.1,8,19,20 Komerční křížové soupravy jsou k dispozici v laboratořích DMS.
A minor crossmatch testuje, zda jsou v plazmě nebo séru dárce přítomny detekovatelné protilátky proti erytrocytům pacienta. Ačkoli je považován za méně důležitý, občas se vyskytují drobné vedlejší reakce. Stálé dárce lze vybírat na základě komerčně nabízených reagencií pro určování krevní skupiny a screeningu protilátek, aby se minimalizovala možnost výskytu drobné vedlejší reakce. Typizační a křížové soupravy obvykle poskytují kontroly k vyloučení falešně pozitivních reakcí z důvodu autoaglutinace nebo tvrdí, že k jejímu ovlivnění nedochází.
Křížová zkouška na sklíčku je hrubá metoda křížové zkoušky, která by měla být vyhrazena pouze pro naléhavé situace. V tomto případě spočívá hlavní křížová zkouška na sklíčku ve smíchání dvou kapek plazmy příjemce s kapkou krve dárce při pokojové teplotě na čistém sklíčku a pozorování aglutinace za současného otáčení sklíčka po dobu jedné minuty. Menší křížovou zkoušku lze provést stejným způsobem s použitím dvou kapek plazmy dárce a jedné kapky krve příjemce. Při této metodě však může dojít ke dvěma potenciálně závažným chybám. Zaprvé může dojít k přehlédnutí potenciálně fatálních hemolytických reakcí, protože hemolýzu je při použití této metody obtížné rozpoznat. Za druhé, tímto postupem lze přehlédnout prozonální reakce, kdy přítomnost nadbytku protilátek vzhledem k množství antigenu může vést k selhání aglutinace.
DETEKCE TRANSFUZNÍ REAKCE
U koček typu B, které dostávají krev typu A, může dojít k akutní intravaskulární hemolytické transfuzní reakci. Závažná reakce se nejčastěji vyskytuje u psů dříve senzibilizovaných na krev DEA 1.1, ale byla hlášena i u psů senzibilizovaných na DEA 4, Dal nebo neidentifikovaný typ (non-DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 7).1,4,5,7 Příznaky spojené s akutní hemolytickou transfuzní reakcí obvykle začínají bezprostředně po zahájení transfuze a mohou zahrnovat horečku, změnu srdeční frekvence, hypotenzi, dušnost, ztrátu kontroly nad močovým měchýřem a střevy, zvracení, hemoglobinemii a hemoglobinurii.21 Protože transfundované buňky podléhají hemolýze, objem sbalených buněk (PCV) se nezvyšuje. Následky mohou zahrnovat diseminovanou intravaskulární koagulaci, selhání ledvin, šok a smrt. Závažnost reakce souvisí s titrem protilátek a množstvím transfundované krve. Pokud se objeví některý z příznaků kromě horečky, transfuze by měla být zastavena a měla by být zahájena vhodná terapie.
Poločas rozpadu typově kompatibilní krve podané psům a kočkám je přibližně tři, resp. pět týdnů. Opožděné transfuzní reakce jsou zákeřnější než akutní reakce a mohou být přehlédnuty nebo připsány jiným událostem, například alergii na antibiotika. V těchto případech může PCV podle očekávání stoupnout a pak v průběhu několika dnů až týdnů klesat. Vzhledem k tomu, že hemolýza je extravaskulární, může být zaznamenán ikterus a hyperbilirubinurie.
První transfuze typu B kočce typu A může vést k opožděné hemolytické reakci. Opožděné reakce se mohou vyskytnout také u psů, kteří poprvé přijímají krev DEA 1.1 nebo DEA 7 a jsou negativní na tyto antigeny, a také u psů, kteří byli dříve senzibilizováni na slabší antigeny. Dárci považovaní za negativní na DEA 1 mohou být ve skutečnosti dárci typu DEA 1.2, pokud se spoléháme pouze na výsledky interní typizační soupravy. V ideálním případě by měli stálí dárci podstoupit kompletní typizaci a screening protilátek, pokud je to možné. Interní typizační soupravy DEA 1.1 by měly být vyhrazeny pro screening potenciálních dárců a typizaci příjemců vyžadujících okamžitou transfuzní léčbu.
Pes, který obdrží krevní skupinu shodnou pro DEA 1.1, může být stále neshodný pro kterýkoli z ostatních antigenů. Univerzální dárci by měli být pozitivní pouze na DEA 4, protože se jedná o běžný antigen a vyvolá senzibilizaci pouze u vzácného psa, který jej nemá. Je však důležité si uvědomit, že krev univerzálních dárců je negativní pouze pro DEA 1.1, 1.2, 3, 5 a 7. Je známo, že krev univerzálních dárců je negativní pouze pro DEA 1.1, 1.2, 3, 5 a 7. Nepolapitelné DEA 6 a 8 a několik dalších antigenů, pro které typizační séra neexistují, mohou být přítomny na erytrocytech univerzálního dárce a mohou senzibilizovat příjemce negativního na kterýkoli z těchto antigenů. Při transfuzi dalmatinů je třeba mít na paměti také antigen Dal.
PŘÍRUČKA PRO TYPOVÁNÍ A KROSSMATCHOVÁNÍ PSŮ
Krossmatching nemusí odhalit nízké koncentrace protilátek nebo předpovědět možnost vzniku protilátek proti neshodné krvi. Opakované transfuze mohou být v některých ordinacích vzácným jevem, ale u ordinací s vysokým počtem pacientů s chronickým onemocněním ledvin nebo podstupujících chemoterapii nebo u ordinací s houževnatými majiteli bojujícími s přetrvávající imunitně zprostředkovanou hemolytickou anémií u svých mazlíčků nejsou opakované transfuze neobvyklé. V těchto případech, kdy se předpokládá opakovaná transfuze, může výběr dárce na základě krevní skupiny maximalizovat účinnost transfuze.
Tabulka 2: Postup při typizaci a křížení psů
Postup podle několika jednoduchých kroků (tabulka 2) vám pomůže rozhodnout, zda stačí jednoduchá typizace DEA 1.1, nebo zda je nutná úplnější typizace a zda je nutné křížení psů za účelem minimalizace transfuzních reakcí a senzibilizace na transfundovanou krev. Stručně řečeno, krev shodná s typem DEA 1.1 je dostačující pro prvního příjemce, který vyžaduje okamžitou transfuzní léčbu. I když dojde k senzibilizaci, přínos transfuze pravděpodobně převáží nad zkráceným poločasem rozpadu transfundovaných buněk. Krev univerzálního dárce se doporučuje jako první volba vždy, když je to možné, a rozhodně tehdy, když se předpokládají opakované transfuze. Křížová transfúze nepomůže u příjemce, který transfúzi dostává poprvé (nebo nedávno), ale je nutná, pokud příjemce dostal transfúzi před čtyřmi a více dny nebo je dalmatin. Běžné antigeny, které chybí u senzibilizovaného příjemce, mohou ztížit nalezení kompatibilní dárcovské krve. V těchto případech je pravděpodobnější, že bude úspěšné křížové porovnání se sourozenci nebo dárci stejného plemene.
Linda M. Vap, DVM, DACVP
Katedra mikrobiologie, imunologie a patologie
College of Veterinary Medicine and Biomedical Sciences
Colorado State University
Fort Collins, CO 80523
1. Hohenhaus AE. Význam krevních skupin a protilátek krevních skupin u společenských zvířat. Transfus Med Rev 2004;18(2):117-126.
2. Swisher SN, Young LE, Trabold N. In vitro and in vivo studies of the behavior of canine erythrocyte-isoantibody systems. Ann N Y Acad Sci 1962;97:15-25.
3. Symons M, Bell K. Expansion of canine A blood group system. Anim Genet 1991;22(3):227-235.
4. Melzer KJ, Wardrop KJ, Hale AS, et al. A hemolytic transfusion reaction due to DEA 4 alloantibodies in a dog. J Vet Intern Med 2003;17(6):931-933.
5. Hale AS. Krevní skupiny psů a jejich význam ve veterinární transfuzní medicíně. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1995;25(6):1323-1332.
6. Wardrop K. Clinical blood typing and crossmatching [Klinická krevní typizace a křížová identifikace]. In: Klíčová slova pro krevní transfúzi: Klíčová slova: Zprávy o transfuzích a transfuzních přípravcích v České republice: Klíčová slova: Feldman BF, Zinkl JG, Jain NC, et al. Schalm’s veterinary hematology. V. vydání. Philadelphia, Pa: Lippincott Williams & Wilkins, 2000.
7. Blais MC, Berman L, Oakley DA, et al. Canine Dal blood type: a red cell antigen lack in some Dalmatians. J Vet Intern Med 2007;21(2):281-286.
8. Giger U, Bucheler J, Patterson DF. Frekvence a dědičnost krevních typů A a B u kočkovitých plemen ve Spojených státech. J Hered 1991;82(1):15-20.
9. Giger U, Kilrain CG, Filippich LJ, et al. Frequencies of feline blood groups in the United States. J Am Vet Med Assoc 1989;195(9):1230-1232.
10. Giger U, Griot-Wenk M, Bucheler J, et al. Geographical variation of the feline blood type frequencies in the United States (Geografická variabilita frekvencí krevních skupin koček ve Spojených státech). Fel Pract 1991;19:21-26.
11. Forcada Y, Guitian J, Gibson G. Frequencies of feline blood types at a referral hospital in a south east of England. J Small Anim Pract 2007;48(10):570-573.
12. Bucheler J, Giger U. Alloantibodies against A and B blood types in cats (A a B krevní skupiny u koček). Vet Immunol Immunopathol 1993;38(3-4):283-295.
13. Bucheler J. Fading kitten syndrome and neonatal isoerythrolysis (Syndrom blednoucího kotěte a neonatální izoerythrolýza). Vet Clin North Am Small Anim Pract 1999;29(4):853-870.
14. Weinstein NM, Blais MC, Harris K, et al. A newly recognized blood group in domestic shorthair cats: the Mik red cell antigen. J Vet Intern Med 2007;21(2):287-292.
15. Seth MWS, Jackson KV, Giger U. Comparison of gel column, card and cartridge techniques for DEA 1.1 blood typing of dogs (Srovnání technik gelové kolony, karty a kazety pro stanovení krevní skupiny psů DEA 1.1), in Proceedings. 26th Annu ACVIM Forum 2008; 775.
16. Marino B. DMS Laboratories Inc, Flemington, NJ: E-mailová komunikace, 2009.
17. Příbalový leták. Testy RapidVet-H pro stanovení krevních skupin psů (06/2009) a koček (09/2008). DMS Laboratories, Inc, Flemington, NJ. www.rapidvet.com.
18. Kessler RJ, Reese J, Chang D, et al. erytrocytární antigeny psů 1.1, 1.2, 3, 4, 7 a Dal krevní typizace a křížová shoda technikou gelového sloupce. Vet Clin Pathol 2010 .
19. Giger U. Blood typing and crosssmatching to ensure compatible transfusions [Typizace krve a křížové párování k zajištění kompatibilních transfuzí]. In: Bonagura JD, ed. Kirk’s current veterinary therapy XIII. Philadelphia, Pa: WB Saunders, 2000;396-399.
20. Giger U. Stanovení krevní skupiny a křížová identifikace. In: Bonagura JD, Twedt DC, eds. Kirk’s current veterinary therapy XIV. St. Louis, Mo: Saunders Elsevier, 2009;260-265.
21. Brown D, Vap LM. Principy krevní transfuze a křížové zkoušky. In: Thrall MA, Baker DC, Campbell TW, et al., eds. Veterinární hematologie a klinická chemie. Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins, 2004:795-798.