Die Normalphasen-Flüssigkeitschromatographie (NPLC) ist eine Technik, bei der mit polaren stationären Phasen gepackte Säulen in Kombination mit unpolaren oder mäßig polaren mobilen Phasen verwendet werden, um die Komponenten von Gemischen zu trennen. Die Geschwindigkeit, mit der einzelne gelöste Stoffe durch NPLC-Säulen wandern, hängt in erster Linie von ihrer Polarität ab. Weniger polare gelöste Stoffe wandern am schnellsten und verlassen daher die Säule und werden zuerst nachgewiesen, gefolgt von gelösten Stoffen mit zunehmender Polarität, die sich langsamer bewegen. Die Polarität kann jedoch manchmal eine untergeordnete Rolle spielen, wenn es um die Fähigkeit eines gelösten Stoffes geht, eine spezifische Wechselwirkung mit aktiven Stellen auf der Oberfläche der stationären Phase einzugehen. Die Bedeutung dieser spezifischen Wechselwirkungen zwischen gelöster Substanz und stationärer Phase bei der NPLC verschafft ihr einige einzigartige Vorteile gegenüber der weiter verbreiteten Umkehrphasen-Flüssigkeitschromatographie (RPLC). Bei der RPLC werden unpolare stationäre Phasen und polare mobile Phasen auf Wasserbasis verwendet, und die Elutionsreihenfolge der gelösten Stoffe in einem Gemisch hängt von ihrer Hydrophobie und nicht von ihrer Polarität ab; polarere gelöste Stoffe bewegen sich am schnellsten und erscheinen zuerst, gefolgt von gelösten Stoffen mit abnehmender Polarität. Die RPLC eignet sich für die Trennung von Gemischen, deren Bestandteile sich im Molekulargewicht und/oder in der Wasserlöslichkeit unterscheiden. Die NPLC wird jedoch bei vielen Trennungsproblemen bevorzugt, einschließlich solcher, bei denen die Wasserlöslichkeit der Probenbestandteile begrenzt ist. Darüber hinaus ist die NPLC eine bessere Technik für die Trennung von Verbindungen, die sich in der Anzahl oder Art der funktionellen Gruppen unterscheiden, und sie ist besonders nützlich für die Trennung vieler Arten von Isomeren.
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