Sedan början av 1900-talet har läkare använt kolloidalt silver oralt, lokalt och intravenöst för att behandla olika tillstånd orsakade av virus, bakterier och svampar. Det har av andra betraktats som en terapi för att ”bota allt”. Silver har sedan dess funnits tillgängligt i olika preparat, t.ex. silvernitrat för profylax av neonatal oftalmi och silversulfadiazin för brännskador. I och med tillkomsten av mer potenta antibiotika blev silver mindre populärt. Negativa effekter av kronisk exponering för silver, som systemisk argyria och i viss mån okulär argyros, har också noterats. Detta kan bero på att preparat av sämre kvalitet bidrar ytterligare till toxiciteten. Inom alternativmedicinen har dock användningen av kolloidalt silver återuppstått. Det ordineras nu för många sjukdomar, inklusive konjunktivit. Kolloidalt silver består av nanopartiklar av silver som är suspenderade i en lösning. Silverpartiklarna är så små att de inte påverkas av gravitationen medan de är jämnt spridda i vatten. Därför ses inga sediment i kolloidala silverpreparat av högsta kvalitet. Partikelstorleken på silvret är väsentlig och bör helst ligga mellan 0,05 och 0,01 mikrometer. Silverets partikelstorlek påverkar dess förmåga att absorberas av kroppen utan att orsaka cellskador på mänsklig vävnad vid låga doser. Den enda negativa effekten är argyria. Kolloidalt silver, den mer biologiskt aktiva formen av silver, absorberas lätt av kroppen.
Silvrets verkningsmekanism på mikrober sägs vara på cellmembrannivå. Det påverkar funktionen hos membranbundna enzymer, t.ex. de som är involverade i andningskedjan, genom att binda till tiolgrupperna. Nya elektronmikroskopiska studier, t.ex. av Yamanaka, Hara och Kudo, tyder dock på att den antimikrobiella verkan sker i cellens cytoplasma. Silver tycks tränga igenom jonkanalerna utan att orsaka skador på cellmembranen. Silver denaturerar ribosomerna och undertrycker uttrycket av enzymer och proteiner som är viktiga för ATP-produktionen, vilket slutligen leder till celldöd. Trots dessa studier finns det många motstridiga rapporter om styrkan hos kolloidalt silver. Vissa studier hävdade att kolloidalt silver inte har någon antimikrobiell egenskap. I en nyligen genomförd studie av Van Hasselt, Gashe och Ahmad testades kolloidalt silver mot liknande grupper av organismer med hjälp av väldiffusionstest (ABAT) och diskdiffusionstest (Kirby Bauer). Dessa tester visade ingen effekt på tillväxten av testorganismerna, vilket tyder på att den antimikrobiella effekten av kolloidalt silver kan vara mer myt än fakta. I denna studie syftade vi till att oberoende verifiera dessa påståenden.
METODER
En stamlösning av kolloidalt silver (30 delar per miljon, ppm) användes för denna studie. Denna stamlösning späddes med sterilt vatten för att producera 20 och 10 ppm kolloidalt silverpreparat. För att bevara silvret i partikelform förvarades dessa i slutna, sterila, bärnstensfärgade flaskor och undvek direkt exponering för ljus och elektriska strömmar. De kolloidala silverlösningarna testades mot kulturer av Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis och Bacillus subtillis med hjälp av antibakteriell aktivitetstestning (ABAT) och Kirby Bauer-skivdiffusion. För ABAT skapades sex brunnar med hjälp av en steril korkborrare som slog hål i agaren på samma avstånd från varandra. Varje bakterieinokulum svabbas över agarytan. En droppe av varje koncentration av kolloidalt silver (10 ppm, 20 ppm, 30 ppm), oftalmiska topiska antibiotika tobramycin (Tobrex, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA), lomefloxacin (Okacin, CIBA Vision Ophthalmics, Basel, Schweiz), moxifloxacin (Vigamox, Alcon Laboratories, Fort Worth, TX, USA) och ampicillin applicerades därefter på agarbrunnen. Ampicillin valdes som kontrollantibiotikum på grund av testorganismernas känslighet för detta. För Kirby Bauers skivdiffusion placerades känslighetsskivor som var indränkta med varje antimikrobiellt medel på samma avstånd på agarplattan, som inokulerades med testorganismen. Olika plattor med olika testorganismer inkuberades i 24 timmar vid 35° Celsius. Läkemedelskänsligheten bedömdes därefter genom att mäta området med klarhet (i millimeter) runt det testade antimikrobiella medlet eller zonen av hämning (tabell 1),
Tabell 2. Testning av antibakteriell aktivitet.
och mätningarna jämfördes med mätningarna av ampicillin för att bedöma resistens eller känslighet för läkemedlet.
RESULTAT
Ingen hämmande aktivitet noterades för 10-, 20- och 30 ppm kolloidalt silverpreparat mot S. aureus, S. epidermidis, B. subtilis och E. coli på ABAT. Stark hämmande aktivitet sågs för tobramycin, lomefloxacin och moxifloxacin medan fullständig hämmande aktivitet noterades för ampicillin mot testorganismerna (tabell 2). Bakteriernas känslighet för 30 ppm kolloidalt silverpreparat visades med Kirby Bauer diskdiffusionsmetoden (tabell 3). Inhibitionszonen för 30-ppm-preparatet mot S. epidermidis var märkbart mindre än för tobramycin, lomefloxacin, moxifloxacin och ampicillin. Inhibitionszonen för preparatet med 30 ppm mot S. aureus var större än för tobramycin och ampicillin, men mindre än för lomefloxacin och moxifloxacin. Inhibitionszonen för preparatet med 30 ppm mot B. subtilis var mindre än för tobramycin, lomefloxacin och moxifloxacin, men större än för ampicillin. Preparaten av kolloidalt silver med 10, 20 och 30 ppm gav inga hämmande zoner mot E. coli. Testantibiotikan tobramycin, lomefloxacin, moxifloxacin och ampicillin visade signifikant hämning mot E. coli.
DISKUSSION
Kolloidalt silver i en koncentration på 30 ppm visade signifikant hämmande aktivitet mot S. epidermidis, S. aureus och B. subtilis på Kirby Bauer diskdiffusionsmetoden. Detta stöder resultat från tidigare studier att silver effektivt hämmar tillväxten av dessa organismer, vilket gör kolloidalt silver till ett effektivt antimikrobiellt medel.
ABAT gav dock negativa resultat, vilket kan bero på förhållanden och ämnen som påverkar stabiliteten hos kolloidalt silver. Enligt tillverkarens rekommendation bör kolloidalt silver förvaras i en försluten, bärnstensfärgad glasflaska för att förhindra direktkontakt med ljus. Kontakt med plast utlöser också en jonisk reaktion, vilket gör att silverpartiklar börjar binda till varandra i stället för att spridas i det vattenhaltiga mediet. Denna hopklumpning av silverpartiklarna ger en kolloidal silverlösning av sämre kvalitet, vilket framgår av att dess färg ändras från ljusgul till brunaktig. I detta tillstånd är det kolloidala silvrets terapeutiska verkan nedsatt. Kliniska observationer tyder på att vår laboratorieteknik kan ha bidragit till de negativa resultaten i ABAT. I Kirby Bauer-diffusionstestet absorberades lösningen av den känsliga skivan, vilket förlängde det kolloidala silvrets verkan på agarplattan genom att förlänga dess avdunstningstid, till skillnad från ABAT, där lösningen droppades i en grop på agarplattan. I framtida studier bör man därför undersöka vilka faktorer som påverkar stabiliteten hos kolloidalt silver. Sammanfattningsvis visade denna studie att de motstridiga resultaten avseende den antimikrobiella aktiviteten hos kolloidalt silver kan bero på skillnader i studiedesign och faktorer som påverkar stabiliteten hos den kolloidala silverlösningen.
1. Wadhera A, Fung M. Systemisk argyria i samband med intag av kolloidalt silver. Dermatol Online J 2005; 11: 12-20.
2. Dean W, Mitchell M, Lugo VW, South J. Reduktion av virusbelastning hos aidspatienter med intravenöst milt silverprotein. Clin Pract Alt Med 2001; 2: 48-53.
3. Brandt D, Park B, Hoang M, Jacobe HT. Argyria sekundärt till intag av hemgjord silverlösning. J Acad Dermatol 2005; 53: S105-S107.
4. Percival SL, Bowler PG, Russell D. Bakteriell resistens mot silver i sårvård. J Hosp Infect 2005; 60: 1-7.
5. Lansdown AB, Sampson B, Laupattarakasem P, Vuttivirojana A. Silver underlättar läkning av sterila hudsår. Br J Dermatol 1997; 137: 728-735.
6. Katzung BG, et al. Basic in Clinical Pharmacology 6th edition: Desinfektionsmedel och antiseptika. 1995; Chapter 51, p749.
7. Walker M, Cochrane CA, Bowler PG, et al. Silver deposition and tissue staining associated with wound dressings containing silver. Ostomy Wound Manage 2006; 52: 42-50.
8. Yamanaka M, Hara K, Kudo J. Applied Environmental Microbiology: 2005 Nov; Bactericidal actions of a Silver Ion solution on Escherichia Coli, studied by energyfiltering Transmission Electron Microscopy and Proteomic Analysis. 71(11): p7589- 93.
9. Van Hasselt P, Gashe BA, Ahmad J. Kolloidalt silver som antimikrobiellt medel: fakta eller fiktion. J Wound Care 2004; 13: 154-155.
Acknowledgment
1. Författarna tackar Vicente O. Santos Jr., MD, medicinsk chef för Fatima Medical Center, för hans ovärderliga stöd, och Joy Delfin, RMT, från Our Lady of Fatima University, för hennes hjälp med att utföra laboratorietesterna.