Blodtyper er klassifikationer af arvelige artsspecifikke antigener på overfladen af røde blodlegemer. Der findes syv blodtyper hos hunde, og fire blodtyper hos katte. Andre celler såsom leukocytter, trombocytter eller celler i andre væv kan også dele disse antigener. Alloantistoffer (eller isoantistoffer) er antistoffer, der findes i serumet mod et antigen fra et andet dyr af samme art. De kan være naturligt erhvervet (f.eks. ved indtagelse af colostrum) eller induceret ved tidligere eksponering (f.eks. transfusion), og deres tilstedeværelse påvises ved en krydsanalyse.
Blodprodukttransfusion kan medføre en lang række skadelige virkninger hos veterinære patienter. Nogle af disse virkninger er almindelige og kan være uundgåelige (f.eks. feber), men andre, såsom immunmedierede akutte og forsinkede transfusionsreaktioner, der er direkte forbundet med uhensigtsmæssige type- og krydsmatchprocesser hos hunde og katte, kan minimeres.
I denne artikel giver jeg en oversigt over blodtypebestemmelse hos hunde og katte og korrekte krydsmatchningsteknikker. Jeg giver også anbefalinger til dyrlæger om beslutningstagning for at hjælpe med at undgå transfusionsreaktioner, og jeg diskuterer de tegn, der kan observeres, hvis der opstår en reaktion.
KANINBLODTYPER OG ANTIBODER
Hundeblodtyper er nummereret i henhold til hundens erytrocytantigen (DEA) system.
DEA 1.1, 1.2 og 1.3
DEA 1 var tidligere kendt som A og består af fire alleler: negativ, 1.1, 1.2 og 1.3. DEA 1.1 nedarves som et autosomalt dominerende træk over DEA 1.2, og nultypen er recessiv for begge. DEA 1.1 og DEA 1.2 er de vigtigste antigener og forekommer tilsammen hos ca. 60 % af hundene.1 Der kan opstå forvirring, fordi begge disse typer er blevet betragtet som A-positive; DEA 1.2-hunde, som udgør 7-29 % af hundene, vil imidlertid udvikle potente anti-DEA 1.1-antistoffer, når de transfunderes med DEA 1.1-celler.
Mens naturligt forekommende antistoffer mod disse antigener generelt betragtes som ikke-eksisterende, kan første transfusioner med DEA 1.1-blod være forbundet med en nedsat cirkulerende levetid for de transfunderede celler, og efterfølgende transfusioner vil være forbundet med en akut hæmolytisk reaktion. Transfusion af DEA 1.2-blod til en sensibiliseret DEA-negativ hund vil resultere i et eksponentielt tab af celler i løbet af flere uger, hvor omkring halvdelen af de transfunderede celler går tabt inden for de første 10 dage.2 DEA 1.3 er kun kendt hos hunde fra Australien, primært tyske hyrder.3
DEA 4
DEA 4 forekommer hos op til 98 % af hundene, og hunde med denne type alene anses for at være universelle donorer. Kun ca. 75 % af dobermannpinschere er DEA 4-positive. Naturligt forekommende DEA 4-antistoffer er ikke kendt; der kan dog forekomme hæmolytiske transfusionsreaktioner efter sensibilisering med DEA 4-positive blodtransfusioner hos hunde, der mangler dette antigen.4
DEA 3 og 5
DEA 3 og 5 kommer til udtryk i mindre andele af hundepopulationen, men DEA 3 forekommer hos 23 % af greyhounds, og 30 % af greyhounds er DEA 5-positive. Naturligt forekommende antistof er til stede hos 20 % af DEA 3-negative hunde og 10 % af DEA 5-negative hunde i USA.2
DEA 7
DEA 7 er til stede hos 8 % til 45 % af de amerikanske hunde. Der er observeret naturligt forekommende antistoffer mod DEA 7 med en forsinket transfusionsreaktion, der forårsager nedsat levetid for transfunderede celler, men ingen hæmolyse.5,6 Selv om der er uenighed om antigenets betydning, er det bedst at undgå for tidligt tab af transfunderede celler ved at anvende donorblod, der mangler dette antigen.
Dal-antigen
Et nyt antigen blev rapporteret i 2007 og fandtes at være til stede hos ca. 93 % af de amerikanske hunde.7 Det blev midlertidigt navngivet Dal, fordi indekstilfældet involverede en dalmatiner. Dalmatineren var typebestemt som DEA 1.1, 3, 4 og 5 positiv og DEA 7 negativ, men blev sensibiliseret efter flere transfusioner for kronisk nyresvigt med blod, der kun var typebestemt som DEA 1.1, 4 positiv. Da det var nødvendigt med yderligere transfusioner, var det nødvendigt at foretage kompatibilitetstest. Større krydsoverensstemmelser mellem indekshunden og 55 ikke-dalmatiner donorer, som skulle have været kompatible på grundlag af typerne DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5 og 7, var uforenelige. Større krydsningsmatches mellem indekshunden og kun 20 ud af 25 (80 %) ubeslægtede dalmatinere var kompatible. Inkompatible transfusioner, der involverer dette antigen, kan resultere i akutte og forsinkede hæmolytiske reaktioner. Når transfusioner bliver nødvendige for sensibiliserede dalmatinere, ser det ud til, at kompatible donorer højst sandsynligt vil kunne findes inden for dalmatinerracen.
Andre antigener
Det vides kun lidt om DEA 6 og 8 og om 11 andre antigener, der menes at eksistere, fordi der ikke findes typingssera for disse antigener. Uden typesera for disse antigener kunne deres relation til Dal ikke bestemmes.
FELINE BLODTYPER OG ANTIBODER
Hos katte er kun AB-systemet blevet rutinemæssigt anerkendt, og det består af tre typer: A, B og AB.
Type A er den mest almindelige og forekommer hos mere end 95 % af de korthårede og langhårede tamkatte i USA. Hidtil er alle siamesiske, burmesiske, tonkinesiske, russisk blå, amerikansk korthårede og orientalsk korthårede katte blevet identificeret som type A.8-10 Type B er blevet identificeret hos op til 10 % af Maine coon-katte og norske skovkatte; op til 20 % af abessinske, birmaniske, persiske, somaliske, sphinx- og skotske foldkatte; og op til 45 % af eksotiske og britisk korthårede katte, Cornish rex og Devon rex-katte. Type AB er blevet observeret hos tamkatte med korthåret katte samt hos racer med type B.11
Dette blodsystem følger simpel mendelsk nedarvning med A (A)-genet, der har dominans over AB (ab)-genet, som har dominans over B (b)-genet. Type A-katte kan have en af tre genotyper: A-A, A-ab eller A-b. Katte af typen AB kan have enten en ab-ab- eller ab-b-genotype, og en type B-kat kan kun have b-b-genotypen. Et avlspar af type A-katte kan således frembringe killinger af type A, AB eller B, afhængigt af deres fænotyper.
I modsætning til hunde har katte markante naturligt forekommende antistoffer. Alle type B-killinger udvikler antistoffer inden for få uger efter fødslen, og der udvikles høje titre i tre måneders alderen.12 Som følge heraf vil type B-killinger have stærke anti-A-antistoffer i deres colostrum uden nogen forudgående eksponering fra drægtighed eller transfusion. Killinger af type A vil også udvikle antistoffer, men disse anses generelt for at være mindre potente. Da antistoffer kan overføres til en killing gennem colostrum i op til 16 timer efter fødslen, kan killinger, der er født sunde, pludselig blive ramt af den hæmolytiske anæmi, der udvikler sig. Denne hæmolytiske anæmi forekommer generelt hos type A- eller AB-killinger, der er født af B-dronninger parret med type A-tomter.13
Type AB-katte anses for at være universelle modtagere, da de mangler anti-A- og anti-B-antistoffer; de bør dog transfunderes med type A-celler for at undgå utilsigtet transfusion af potente anti-A-antistoffer fra en type B-donor, hvilket er et eksempel på en mindre alvorlig bivirkning. På grund af virkningerne af geografi og race på hyppigheden af blodtyper kan risikoen for at fremkalde en potentielt dødelig transfusionsreaktion hos B-type-modtagere være så høj som 20 % ved transfusion af uoverensstemmende blod.
Mik-antigen
Et nyt antigen, Mik, blev rapporteret i 2007 og er til stede hos mange tamkatte.14 Katte, der mangler dette antigen (ca. 6 % af de testede), har potentiale til at udvikle en akut hæmolytisk reaktion efter transfusion af AB-matchet blod. Da der ikke findes typeserum for Mik-antigenet, og antistoffer synes at være naturligt forekommende, er det klogt at krydsmatche selv typetilpassede katte før en transfusion.
BLODTYPNING OG KRÆSSEMATCHNING
Frisk opsamlet blod i EDTA og en blodprop eller et almindeligt rør fra både modtager og donor anbefales til typebestemmelse og krydsmatchning, medmindre donor tidligere er blevet screenet for antistoffer, i hvilket tilfælde kun donorceller fra EDTA-prøven er nødvendige. Alternativt kan der anvendes slangesegmenter (“pigtails”) (figur 1) fra donorenheden, så længe enhedens sterilitet er intakt. Prøverne skal være fri for hæmolyse og lipæmi.
Figur 1. “Pigtails” fra donorenheden kan anvendes til blodtypebestemmelse og til krydsmatchning med modtageren, så længe enhedens sterilitet er intakt. (Foto af Charlie Kerlee.)
Der findes kommercielle blodtypebestemmelsessæt til hunde og katte, som kan bruges til at screene potentielle donorer og til at foretage passende valg til krydsmatchning og transfusioner på grundlag af modtagerens blodtype. Som eksempler kan nævnes typningskort (DMS Laboratories) og en immunokromatografisk patron (Alvedia) (tabel 1). Disse sæt typebestemmer kun for DEA 1.1 hos hunde og for A, B og AB hos katte. Både kort og patroner er relativt enkle typebestemmelsesmetoder, der kun tager få minutter at udføre, og de omfatter en mulighed for at udføre en autokontrol for at identificere potentiel interferens fra autoagglutination. Ved anvendelse af en 2+ agglutineringsendpunktsreaktion for kortene blev der i en undersøgelse opnået tre falsk negative og fem falsk positive reaktioner ud af 88 testede hundeprøver.15 Dette problem er efter sigende blevet korrigeret.16 I den samme undersøgelse opnåede patronen ingen falsk negative og seks falsk positive resultater. En gelkolonne-diffusionsassay-test (DiaMed), der blev anvendt i denne undersøgelse, er ikke længere tilgængelig på veterinærmarkedet.
Tabel 1: Udvalgte websteder om blodtypebestemmelse og blodprodukter
Fejlige resultater kan opnås ved manglende overholdelse af kitinstruktionerne. Autoagglutination og krydskontaminering fra tidligere anvendte rørepinde kan forårsage falsk positive resultater med korttypemetoder. Der kan opnås falske negative resultater med blod fra ekstremt anæmiske dyr (PCV < 10 %) og ved en prozonreaktion (for meget antistof i forhold til mængden af tilstedeværende antigen).17
En nylig undersøgelse tyder på, at der muligvis vil komme et mere grundigt, udvidet typebestemmelseskit til rådighed, som kan typebestemme for DEA 1.1, 3, 4, 7 og Dal.18 Der blev ikke fundet en passende fortynding af typebestemmelsesreagenset til DEA 1.2, og DEA 5 blev ikke medtaget. I denne undersøgelse modtog 10 hunde DEA 1.1-kompatible transfusioner og blev krydsmatchet før og efter transfusionerne. Seks af krydsmatchparringerne hos fire af hundene kunne have udviklet antistoffer på grundlag af typningsresultaterne, og fire krydsmatchninger med to hunde blev inkompatible 21-23 dage senere med reaktionsstyrker fra 3+ til 4+. En tredje hund havde en 1+ inkompatibilitet på dag 13, som blev kompatibel på dag 50. Fem krydsmatchparringer hos fire hunde forventedes ikke at udvikle antistoffer på grundlag af de udvidede typebestemmelsesresultater; der blev imidlertid opnået større inkompatible krydsmatchresultater med en styrke på mellem 1+ og 3+ i løbet af to til fire uger. Disse inkompatible resultater tyder på sensibilisering over for antigener, der ikke blev påvist ved typningsprocessen (f.eks. DEA 5, 6, 8).
Selv om disse typningsmetoder er relativt enkle, skal du læse indlægssedlerne grundigt for kilder til potentielt fejlagtige resultater og følge instruktionerne nøjagtigt. Når bekræftende testning er nødvendig, f.eks. til udvælgelse af permanente donorer, til kontrol af tvivlsomme resultater eller i stedet for intern typebestemmelse i forbindelse med elektive operationer, kan der anvendes eksterne laboratorier som Animal Blood Resources International i Stockbridge, Mich. eller University of Pennsylvania’s Hematology and Transfusion Laboratory. Den udvidede mulighed for blodtypebestemmelsessæt kan udvide disse muligheder til andre teststeder.
En større krydsmatchningstest tester for påviselige naturligt forekommende eller inducerede antistoffer i modtagerens serum mod donorens erytrocytter. Denne test bør udføres, hver gang det er sandsynligt, at en patient har relevante naturligt forekommende antistoffer (katte), hvis patientens transfusionshistorie er ukendt, eller hvis en transfusion har fundet sted mindst to til fire dage tidligere, selv om det var med den samme donor.1,8,19,20 Kommercielle krydsmatch-kits fås fra DMS Laboratories.
En mindre krydsmatch-test tester, om der er påviselige antistoffer i donorplasmaet eller -serummet mod patientens erytrocytter. Selv om de anses for mindre vigtige, forekommer der lejlighedsvis mindre bivirkninger. Permanente donorer kan udvælges på grundlag af kommercielt udbudte reagenser til blodtypebestemmelse og screening for antistoffer med henblik på at minimere risikoen for en mindre bivirkning. Typebestemmelses- og crossmatch-sættene indeholder typisk kontroller for at udelukke falske positive reaktioner på grund af autoagglutination eller hævder, at der ikke er nogen interferens fra autoagglutination.
En slide crossmatch er en grov metode til crossmatching, som kun bør forbeholdes nødsituationer. I dette tilfælde består den store slide crossmatch af at blande to dråber modtagerplasma med en dråbe blod fra donoren ved stuetemperatur på et rent objektglas og observere for agglutination, mens objektglasset roterer i et minut. En mindre crossmatch kan udføres på samme måde ved hjælp af to dråber donorplasma og en dråbe blod fra recipienten. Der kan dog opstå to potentielt alvorlige fejl ved denne metode. For det første kan potentielt fatale hæmolytiske reaktioner overses, da hæmolyse er vanskelig at genkende ved hjælp af denne metode. For det andet kan denne procedure overse prozonreaktioner, hvor tilstedeværelsen af et overskud af antistoffer i forhold til antigenmængden kan medføre, at agglutinationen ikke lykkes.
DETEKTERING AF EN TRANSFUSIONSREAKTION
En akut intravaskulær hæmolytisk transfusionsreaktion kan forekomme hos katte af type B, der modtager blod af type A. En alvorlig reaktion forekommer oftest hos hunde, der tidligere er sensibiliseret over for DEA 1.1 blod, men den er også blevet rapporteret hos hunde, der er sensibiliseret over for DEA 4, Dal eller en uidentificeret type (ikke-DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 7).1,4,5,7 Tegn i forbindelse med akutte hæmolytiske transfusionsreaktioner begynder typisk umiddelbart efter påbegyndelse af transfusionen og kan omfatte feber, ændret hjertefrekvens, hypotension, dyspnø, tab af blære- og tarmkontrol, opkastning, hæmoglobinæmi og hæmoglobinurie.21 Da de transfunderede celler gennemgår hæmolyse, stiger det pakkede cellevolumen (PCV) ikke. Følgesygdomme kan omfatte dissemineret intravaskulær koagulation, nyresvigt, chok og død. Reaktionens sværhedsgrad er forbundet med antistoftiteren og den transfunderede blodmængde. Hvis der konstateres tegn ud over feber, bør transfusionen standses, og der bør iværksættes passende behandling.
Halveringstiden for type-kompatibelt blod, der administreres til hunde og katte, er henholdsvis ca. tre og fem uger. Forsinkede transfusionsreaktioner er mere snigende end akutte reaktioner og kan overses eller tilskrives andre hændelser, f.eks. en antibiotikarelateret allergi. I disse tilfælde kan PCV-værdien stige som forventet og derefter falde i løbet af flere dage til uger. Da hæmolysen er ekstravaskulær, kan der konstateres icterus og hyperbilirubinuri.
En første gangs type B-transfusion til en type A-kat kan resultere i en forsinket hæmolytisk reaktion. Forsinkede reaktioner kan også forekomme hos hunde, der for første gang modtager DEA 1.1 eller DEA 7 blod, som er negative for disse antigener, samt hos hunde, der tidligere er sensibiliseret mod svagere antigener. Donorer, der anses for DEA 1-negative, kan i virkeligheden være af typen DEA 1.2, hvis man udelukkende stoler på resultaterne af det interne typebestemmelsessæt. Ideelt set bør permanente donorer om muligt gennemgå en fuldstændig typebestemmelse og antistofscreening. De interne DEA 1.1-typesæt bør forbeholdes til screening af potentielle donorer og typebestemmelse af modtagere, der kræver øjeblikkelig transfusionsbehandling.
En hund, der modtager blodtype-matchet for DEA 1.1, kan stadig være fejlmatchet for ethvert af de andre antigener. Universelle donorer bør kun være positive for DEA 4, da det er et almindeligt antigen og kun vil fremkalde sensibilisering hos den sjældne hund, der mangler det, og kun hos den sjældne hund, der mangler det. Det er dog vigtigt at huske, at universaldonorblod kun er kendt for at være negativt for DEA 1.1, 1.2, 3, 5 og 7. De flygtige DEA 6 og 8 og flere andre antigener, som der ikke findes typesera for, kan være til stede på universal donor erythrocytter og kan sensibilisere en modtager, der er negativ for et eller flere af disse antigener. Dal-antigenet skal også tages i betragtning ved transfusion af dalmatinere.
GUIDE TIL TYPNING OG CROSSMATCHING AF HUNDE
Korsmatchning kan muligvis ikke påvise lave koncentrationer af antistoffer eller forudsige potentialet for at udvikle antistoffer mod fejlmatchet blod. Gentagne transfusioner kan være en sjælden foreteelse i nogle praksis, men for dem med et stort antal patienter med kronisk nyresygdom eller som modtager kemoterapi eller for dem med stædige ejere, der kæmper mod vedvarende immunmedieret hæmolytisk anæmi hos deres kæledyr, er gentagne transfusioner ikke ualmindeligt. I disse tilfælde, hvor der forventes flere transfusioner, kan donorvalg baseret på blodtype maksimere transfusionens effektivitet.
Tabel 2: Proces for typebestemmelse og krydsmatchning af hunde
Følgelse af et par enkle trin (tabel 2) kan hjælpe dig med at beslutte, om en simpel DEA 1.1-typebestemmelse er tilstrækkelig, eller om der er behov for en mere komplet typebestemmelse, og om det er nødvendigt at krydsmatche hunde for at minimere transfusionsreaktioner og sensibilisering over for transfusionsblod. Kort fortalt er DEA 1.1-typematchet blod tilstrækkeligt til en førstegangs-modtager, der kræver øjeblikkelig transfusionsbehandling. Selv hvis der opstår sensibilisering, opvejer fordelene ved transfusionen sandsynligvis den forkortede halveringstid for de transfunderede celler. Universelt donorblod anbefales som førstevalg, når det er muligt, og i hvert fald når der forventes gentagne transfusioner. Krydsmatchning vil ikke være nyttig for en modtager, der modtager blod for første gang (eller for nylig), men er påkrævet, hvis modtageren har modtaget en transfusion fire eller flere dage tidligere eller er en dalmatiner. Almindelige antigener, som mangler hos en sensibiliseret modtager, kan gøre det vanskeligt at finde kompatibelt donorblod. I disse tilfælde er det mere sandsynligt, at krydsmatchning mod søskende eller donorer af samme race vil være en succes.
Linda M. Vap, DVM, DACVP
Department of Microbiology, Immunology and Pathology
College of Veterinary Medicine and Biomedical Sciences
Colorado State University
Fort Collins, CO 80523
1. Hohenhaus AE. Betydningen af blodgrupper og blodgruppeantistoffer hos kæledyr. Transfus Med Rev 2004;18(2):117-126.
2. Swisher SN, Young LE, Trabold N. In vitro- og in vivo-undersøgelser af opførslen af erythrocyt-isoantistofsystemer hos hunde. Ann N Y Acad Sci 1962;97:15-25.
3. Symons M, Bell K. Udvidelse af blodgruppesystemet A hos hunde. Anim Genet 1991;22(3):227-235.
4. Melzer KJ, Wardrop KJ, Hale AS, et al. En hæmolytisk transfusionsreaktion på grund af DEA 4-alloantistoffer hos en hund. J Vet Intern Med 2003;17(6):931-933.
5. Hale AS. Canine blood groups and their importance in veterinary transfusion medicine. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1995;25(6):1323-1332.
6. Wardrop K. Klinisk blodtypebestemmelse og krydsmatchning. In: Feldman BF, Zinkl JG, Jain NC, et al. Schalm’s veterinary hematology. 5th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott Williams & Wilkins, 2000.
7. Blais MC, Berman L, Oakley DA, et al. Canine Dal blood type: a red cell antigen lacking in some Dalmatians. J Vet Intern Med 2007;21(2):281-286.
8. Giger U, Bucheler J, Patterson DF. Hyppighed og arvelighed af A- og B-blodtyper hos katteracer i USA. J Hered 1991;82(1):15-20.
9. Giger U, Kilrain CG, Filippich LJ, et al. Frekvenser af katteblodgrupper i USA. J Am Vet Med Assoc 1989;195(9):1230-1232.
10. Giger U, Griot-Wenk M, Bucheler J, et al. Geografisk variation af hyppigheden af katteblodtyper i USA. Fel Pract 1991;19;19:21-26.
11. Forcada Y, Guitian J, Gibson G. Frekvenser af katteblodtyper på et henvisningshospital i det sydøstlige England. J Small Anim Pract 2007;48(10):570-573.
12. Bucheler J, Giger U. Alloantistoffer mod A- og B-blodtyper hos katte. Vet Immunol Immunopathol 1993;38(3-4):283-295.
13. Bucheler J. Fading kittens syndrom og neonatal isoerytrolyse. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1999;29(4):853-870.
14. Weinstein NM, Blais MC, Harris K, et al. En nyligt anerkendt blodgruppe hos tamkatte med kort hår: Mik red cell-antigenet. J Vet Intern Med 2007;21(2):287-292.
15. Seth MWS, Jackson KV, Giger U. Comparison of gel column, card and cartridge techniques for DEA 1.1 blood typing of dogs, in Proceedings. 26th Annu ACVIM Forum 2008; 775.
16. Marino B. DMS Laboratories Inc, Flemington, NJ: E-mail kommunikation, 2009.
17. Pakkeomslag. RapidVet-H blodgruppebestemmelsesassays for hunde (06/2009) og katte (09/2008). DMS Laboratories, Inc, Flemington, NJ. www.rapidvet.com.
18. Kessler RJ, Reese J, Chang D, et al. Hundens erytrocytantigener 1.1, 1.2, 3, 4, 7 og Dal-blodtypebestemmelse og krydsmatchning ved hjælp af gelkolonneteknik. Vet Clin Pathol 2010 .
19. Giger U. Blodtypebestemmelse og krydsmatchning for at sikre kompatible transfusioner. In: Bonagura JD, ed. Kirk’s current veterinary therapy XIII. Philadelphia, Pa: WB Saunders, 2000;396-399.
20. Giger U. Blodtypebestemmelse og krydsning. In: Bonagura JD, Twedt DC, eds. Kirk’s current veterinary therapy XIV. St. Louis, Mo: Saunders Elsevier, 2009;260-265.
21. Brown D, Vap LM. Principper for blodtransfusion og krydsmatchning. In: Thrall MA, Baker DC, Campbell TW, et al., eds. Veterinær hæmatologi og klinisk kemi. Baltimore, Md: Lippincott Williams & Wilkins, 2004:795-798.