Silice e allumina non sono le uniche fasi solide possibili. Si possono acquistare fasi stazionarie che hanno lunghe catene di carbonio legate a perline di silice. Per esempio, una colonna C18 contiene perline che hanno 18 catene di carbonio attaccate a loro. Queste fasi stazionarie sono polveri, come la silice, e possono essere caricate in una colonna proprio come la silice.

Figura \(\PageIndex{1}): Una vignetta di una perlina C18

Una colonna C18 è un esempio di colonna a “fase inversa”. Le colonne a fase inversa sono spesso usate con solventi più polari come acqua, metanolo o acetonitrile. La fase stazionaria è un idrocarburo non polare, mentre la fase mobile è un liquido polare.

Lo stesso approccio può essere utilizzato anche nella TLC. Se una piastra viene spruzzata con uno strato di perline C18, allora possiamo eluire la piastra in un solvente polare e separare i composti in un campione. Naturalmente, le cose sono invertite ora. I composti più polari passeranno più tempo nella fase mobile e si muoveranno più rapidamente. I composti meno polari passeranno più tempo nella fase stazionaria, e si muoveranno più lentamente.

Figura \(\PageIndex{2}): Una vignetta della cromatografia in fase inversa.

Esercizio \(\PageIndex{1})

Su una colonna di silice (SiO2), tre composti sono stati eluiti nel seguente ordine usando una miscela esano/acetato di etile: p-dimetilbenzene, p-dimetossibenzene, poi p-metossifenolo. Quale potrebbe essere l’ordine di eluizione su una colonna C18?

Risposta

p-metossifenolo, poi p-dimetossibenzene, poi p-dimetilbenzene

Esercizio \(\PageIndex{2})

Stai cercando di eluire un campione su una colonna C18 usando una miscela 20:80 di acqua:acetontrile, ma i composti ci stanno mettendo troppo a passare attraverso la colonna. Cosa dovresti fare?

Risposta

I composti non stanno passando molto tempo nella fase mobile e hanno un’affinità molto più alta per la fase stazionaria non polare; usa più acetonitrile e meno acqua nella fase mobile.t.

Uno dei vantaggi della cromatografia in fase inversa è che ci sono molti tipi di fase stazionaria tra cui scegliere. Cambiando il tipo di catena che è alla perlina, possiamo alterare quanto fortemente interagirà con certe molecole. Forse un imballaggio completamente saturo di idrocarburi interagisce bene con gli idrocarburi saturi nel campione, facendoli eluire più lentamente. D’altra parte, forse un imballaggio più rigido che contiene aromatici interagirà meglio con gli idrocarburi aromatici nel campione, facendoli eluire più lentamente. Potremmo anche avere alcuni gruppi polari mescolati, per ottenere una miscela di interazioni.

Esercizio \(\PageIndex{3})

Prevedere l’ordine in cui i seguenti composti eluiscono da una colonna a fase inversa.

  1. butilbenzene e benzilamina
  2. 2-decanolo e acido decanoico
  3. 1-eptanolo e 1-etene
  4. octanal e metil ottile etere

Risposta Risposta a

benzilamina poi butilbenzene

Risposta b

2-decanolo poi acido decanoico

Risposta c

1-eptanolo poi 1-etene

Risposta d

octanal poi metil ottile etere

Attribuzione

Chris P Schaller, Ph.D., (College of Saint Benedict / Saint John’s University)

Lascia un commento

Il tuo indirizzo email non sarà pubblicato.