固相はシリカとアルミナだけが可能なわけではないのです。 シリカビーズに長い炭素鎖を結合させた固定相を購入することができます。 例えば、C18カラムは、18本の炭素鎖が結合したビーズを含んでいます。 この固定相はシリカと同じ粉末で、シリカと同じようにカラムに充填することができます。 C18ビーズのマンガ
C18カラムは「逆相」カラムの一例です。 逆相カラムは、水、メタノール、アセトニトリルなどの極性溶媒で使用されることが多い。 固定相は非極性の炭化水素で、移動相は極性の液体です。
同じ方法はTLCでも使用できます。 プレートにC18ビーズの層をスプレーしておけば、極性溶媒で溶出させ、サンプル中の化合物を分離することができるのです。 もちろん、今は状況が逆転している。 極性の高い化合物は、移動相中で最も長い時間を過ごし、最も速く移動します。 極性の低い化合物は固定相にいる時間が長く、移動速度が遅い。
Figure (\PageIndex{2}): 逆相クロマトグラフィーの漫画です。
演習 ㊦(\PageIndex{1})
シリカ（SiO2）カラムで、ヘキサンと酢酸エチル混合液を使ってp-ジメチルベンゼンとp-ジメトキシベンゼンとp-メトキシフェノールが順に溶出されました。 C18カラムではどのような溶出順序になると予想されますか？
Answer
p-methoxyphenol → p-dimethoxybenzene → p-dimethylbenzene
演習 ୧(୧ˊᗜˋ*)୨⃛ C18カラムで水：アセトントリルの20：80混合の溶出を試みるが化合物が通過するのに非常に時間がかかりすぎる。
回答
化合物は移動相であまり時間をかけておらず、非極性固定相への親和性が非常に高いため、移動相にアセトニトリルを多く、水を少なくします。 ビーズに付いている鎖の種類を変えることで、特定の分子とどれだけ強く相互作用するかを変えることができます。 例えば、完全飽和炭化水素充填剤は、サンプル中の飽和炭化水素とよく相互作用し、溶出をより遅くすることができます。 一方、芳香族を含むより硬い充填剤は、試料中の芳香族炭化水素とよく相互作用し、それらの溶出をより遅くすることができます。
練習問題
次の化合物が逆相カラムから溶出する順番を予測しなさい。
- ブチルベンゼンとベンジルアミン
- 2-デカノールとデカン酸
- 1-heptanol と 1-heptene
- octanal とメチルオクチルエーテル
Answer Answer a
benzylamine then butylbenzene
Answer b
2->benzyl amone decanic acid 1-heptanol and 1-heptene benzyl amone
decanaal とメチルオクチルエーテルdecanic acid decanic acidデカノール→デカン酸
Answer c
1-heptanol→1-heptene
Answer d
octanal→metyl octy ether
帰属
Chris P Schaller, 博士号D., (セント・ベネディクト大学／セント・ジョンズ大学）