Silica og aluminiumoxid er ikke de eneste mulige faste faser. Der kan købes stationære faser, som har lange kulstofkæder bundet til silica perler. En C18-kolonne indeholder f.eks. perler, som har 18 kulstofkæder bundet til sig. Disse stationære faser er pulvere ligesom silica, og de kan indlæses i en kolonne ligesom silica.

Figur \(\PageIndex{1}\): En tegning af en C18-perle

En C18-kolonne er et eksempel på en “omvendt fase”-kolonne. Omvendt fase-kolonner anvendes ofte med mere polære opløsningsmidler som f.eks. vand, methanol eller acetonitril. Den stationære fase er et upolært kulbrinte, mens den mobile fase er en polær væske.

Den samme fremgangsmåde kan også anvendes i TLC. Hvis en plade sprøjtes med et lag af C18-perler, kan vi eluere pladen i et polært opløsningsmiddel og adskille forbindelser i en prøve. Nu er tingene naturligvis omvendt. De mest polære forbindelser vil tilbringe mest tid i den mobile fase og bevæge sig hurtigst. De mindst polære forbindelser vil tilbringe mest tid i den stationære fase og bevæge sig langsomst.

Figur \(\PageIndex{2}\): En tegning af omvendt fasekromatografi.

Ovelse \(\PageIndex{1}\)

På en silica (SiO2)-kolonne blev tre forbindelser elueret i følgende rækkefølge ved hjælp af en hexan/ethylacetat-blanding: p-dimethylbenzen, p-dimethoxybenzen og derefter p-methoxyphenol. Hvad kunne man forvente, at elueringsrækkefølgen ville være på en C18-kolonne?

Svar

p-methoxyphenol, derefter p-dimethoxybenzen, derefter p-dimethylbenzen

Ovelse \(\PageIndex{2}\)

Du forsøger at eluere en prøve på en C18-søjle ved hjælp af en 20:80-blanding af vand:acetontrile, men forbindelserne er for længe om at komme igennem søjlen. Hvad skal du gøre?

Svar

Forbindelserne bruger ikke meget tid i den mobile fase og har en meget højere affinitet for den upolære stationære fase; brug mere acetonitril og mindre vand i den mobile fase.t.

En af fordelene ved omvendt fase-kromatografi er, at der er mange slags stationær fase, som man kan vælge imellem. Ved at ændre den slags kæde, der er til perlen, kan vi ændre, hvor stærkt den vil interagere med visse molekyler. Måske interagerer en helt mættet kulbrintepakning godt med mættede kulbrinter i prøven, hvilket gør at de elueres langsommere. På den anden side vil en mere stiv pakning, der indeholder aromater, måske interagere bedre med aromatiske kulbrinter i prøven, hvilket gør, at disse elueres langsommere. Der kan endda være nogle polære grupper blandet ind, så vi får en blanding af interaktioner.

Ovelse \(\PageIndex{3}\)

Forudsig i hvilken rækkefølge følgende forbindelser vil elueres fra en omvendtfasekolonne.

  1. butylbenzen og benzylamin
  2. 2-decanol og decansyre
  3. 1-heptanol og 1-hepten
  4. octanal og methyloktylether

Svar a

benzylamin derefter butylbenzen

Svar b

2-decanol derefter decansyre

Svar c

1-heptanol derefter 1-hepten

Svar d

octanal derefter methylokty ether

Attribution

Chris P Schaller, Ph.D., (College of Saint Benedict / Saint John’s University)

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.