Free Press

Křemelina a oxid hlinitý nejsou jediné možné pevné fáze. Lze zakoupit stacionární fáze, které mají dlouhé uhlíkové řetězce navázané na kuličky oxidu křemičitého. Například kolona C18 obsahuje kuličky, které mají navázané 18-uhlíkové řetězce. Tyto stacionární fáze jsou práškové, stejně jako oxid křemičitý, a lze je vložit do kolony stejně jako oxid křemičitý.

Kolona C18 je příkladem kolony s „reverzní fází“. Kolony s reverzní fází se často používají s polárnějšími rozpouštědly, jako je voda, metanol nebo acetonitril. Stacionární fází je nepolární uhlovodík, zatímco mobilní fází je polární kapalina.

Stejný přístup lze použít i při TLC. Pokud desku postříkáme vrstvou kuliček C18, můžeme desku eluovat v polárním rozpouštědle a oddělit sloučeniny ve vzorku. Nyní je ovšem situace obrácená. Nejpolárnější sloučeniny stráví v mobilní fázi nejvíce času a budou se pohybovat nejrychleji. Nejméně polární sloučeniny stráví nejvíce času ve stacionární fázi a budou se pohybovat nejpomaleji.

Obrázek \(\PageIndex{2}\):

Jednou z výhod chromatografie na reverzní fázi je, že existuje mnoho druhů stacionárních fází, ze kterých si můžete vybrat. Změnou druhu řetězce, který je na kuličce, můžeme změnit, jak silně bude interagovat s určitými molekulami. Třeba zcela nasycený uhlovodíkový obal dobře interaguje s nasycenými uhlovodíky ve vzorku, takže se eluují pomaleji. Na druhé straně možná tuhší obal, který obsahuje aromáty, bude lépe interagovat s aromatickými uhlovodíky ve vzorku, takže ty budou eluovat pomaleji. Můžeme mít dokonce přimíchány některé polární skupiny, abychom získali směs interakcí.