Blodtyper är klassificeringar av ärftliga artspecifika antigener på de röda blodkropparnas yta. Sju blodtyper känns igen hos hundar och fyra blodtyper identifieras hos katter. Andra celler som leukocyter, trombocyter eller celler i andra vävnader kan också dela dessa antigener. Alloantikroppar (eller isoantikroppar) är antikroppar som finns i serumet mot ett antigen från ett annat djur av samma art. Dessa kan vara naturligt förvärvade (t.ex. intag av råmjölk) eller framkallade genom tidigare exponering (t.ex. transfusion), och deras närvaro påvisas genom en korsmatchning.
Transfusion av blodprodukter kan ge upphov till ett stort antal skadliga effekter hos veterinära patienter. Vissa av dessa effekter är vanliga och kan vara oundvikliga (t.ex. feber), men andra, t.ex. immunmedierade akuta och fördröjda transfusionsreaktioner som är direkt förknippade med olämpliga typ- och korsmatchningsprocesser hos hundar och katter, kan minimeras.
I den här artikeln presenterar jag en översikt över blodtypning hos hundar och katter och korrekt korsmatchningsteknik. Jag erbjuder också beslutsrekommendationer för veterinärer för att hjälpa till att undvika transfusionsreaktioner, och jag diskuterar de tecken som kan observeras om en reaktion inträffar.
KANINBLODTYPER OCH ANTIBODER
Hundens blodtyper är numrerade enligt DEA-systemet (dog erythrocyte antigen).
DEA 1.1, 1.2 och 1.3
DEA 1 kallades tidigare A och består av fyra alleler: negativ, 1.1, 1.2 och 1.3. DEA 1.1 ärvs som ett autosomalt dominant drag över DEA 1.2, och nolltypen är recessiv till båda. DEA 1.1 och DEA 1.2 är de viktigaste antigenerna och förekommer tillsammans hos cirka 60 % av hundarna.1 Förvirring kan uppstå eftersom båda dessa typer har betraktats som A-positiva. DEA 1.2-hundar, som utgör 7-29 % av hundarna, kommer dock att utveckla potenta anti-DEA 1.1-antikroppar när de transfunderas med DEA 1.1-celler.
Men även om naturligt förekommande antikroppar mot dessa antigener i allmänhet anses obefintliga kan första transfusionen med DEA 1.1-blod förknippas med en minskad cirkulerande livslängd hos de transfunderade cellerna, och efterföljande transfusioner kommer att förknippas med en akut hemolytisk reaktion. Transfusion av DEA 1.2-blod till en sensibiliserad DEA-negativ hund kommer att resultera i en exponentiell förlust av celler under flera veckor, med ungefär hälften av de transfunderade cellerna förlorade inom de första 10 dagarna.2 DEA 1.3 är endast känt hos hundar från Australien, främst tyska herdar.3
DEA 4
DEA 4 förekommer hos upp till 98 % av alla hundar, och hundar som enbart har denna typ betraktas som universella givare. Endast cirka 75 % av dobermannpinscherna är DEA 4-positiva. Naturligt förekommande DEA 4-antikroppar är inte kända, men hemolytiska transfusionsreaktioner kan förekomma efter sensibilisering med DEA 4-positiva blodtransfusioner hos hundar som saknar detta antigen.4
DEA 3 och 5
DEA 3 och 5 uttrycks i mindre proportioner av hundpopulationen, men DEA 3 förekommer hos 23 % av greyhounds och 30 % av greyhounds är DEA 5-positiva. Naturligt förekommande antikroppar finns hos 20 % av DEA 3-negativa hundar och 10 % av DEA 5-negativa hundar i USA.2
DEA 7
DEA 7 finns hos 8 % till 45 % av hundarna i USA. Naturligt förekommande antikroppar har observerats mot DEA 7, med en fördröjd transfusionsreaktion som orsakar minskad livslängd hos transfunderade celler men ingen hemolys.5,6 Även om det råder kontroverser om antigenets betydelse är det bästa sättet att undvika en för tidig förlust av transfunderade celler genom att använda donatorblod som saknar detta antigen.
Dal antigen
Ett nytt antigen rapporterades 2007 och visade sig finnas hos cirka 93 % av hundarna i USA.7 Det fick tillfälligt namnet Dal eftersom indexfallet gällde en dalmatiner. Dalmatinern var typad som DEA 1.1, 3, 4 och 5 positiv och DEA 7 negativ men blev sensibiliserad efter flera transfusioner för kronisk njursvikt med blod som endast var typat som DEA 1.1, 4 positivt. Eftersom ytterligare transfusioner var nödvändiga krävdes kompatibilitetstest. Större korsmatchningar mellan indexhunden och 55 donatorer som inte är dalmatiner och som borde ha varit kompatibla på grundval av blodtyperna DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5 och 7 var inkompatibla. Större korsmatchningar mellan indexhunden och endast 20 av 25 (80 %) icke besläktade dalmatiner var kompatibla. Inkompatibla transfusioner med detta antigen kan leda till akuta och fördröjda hemolytiska reaktioner. När transfusioner blir nödvändiga för sensibiliserade dalmatiner verkar det som om kompatibla donatorer med största sannolikhet kommer att hittas inom dalmatinerrasen.
Andra antigener
Det är föga känt om DEA 6 och 8 och om 11 andra antigener som tros existera eftersom typningssera för dessa antigener inte finns tillgängliga. Utan typningssera för dessa antigener kunde deras förhållande till Dal inte fastställas.
FELINBLODTYPER OCH ANTIBODER
Hos katter har endast AB-systemet erkänts rutinmässigt och består av tre typer: A, B och AB.
Typ A är den vanligaste och förekommer hos mer än 95 % av de korthåriga och långhåriga huskatterna i USA. Hittills har alla siamesiska, burmesiska, tonkinesiska, ryskblå, amerikansk korthåriga och orientaliskt korthåriga katter identifierats som typ A.8-10 Typ B har identifierats hos upp till 10 % av Maine coon- och norska skogskatter, upp till 20 % av abessinier-, birman-, perser-, somali-, sfinx- och skotska foldkatter och upp till 45 % av exotiska och brittisk korthåriga katter, cornish rex- och devon rex-katter. Typ AB har observerats hos tama korthåriga katter samt hos raser med typ B.11
Detta blodsystem följer enkel mendelsk nedärvning med A (A) genen som har dominans över AB (ab) genen, som har dominans över B (b) genen. Katter av typ A kan ha någon av tre genotyper: A-A, A-ab eller A-b. Katter av typ AB kan ha antingen genotypen ab-ab eller ab-b, och en katt av typ B kan endast ha genotypen b-b. Ett avelspar av typ A-katter kan alltså producera kattungar av typ A, AB eller B, beroende på deras fenotyp.
Till skillnad från hundar har katter markerade naturligt förekommande antikroppar. Alla kattungar av typ B utvecklar antikroppar inom några veckor efter födseln, och höga titrar utvecklas vid tre månaders ålder.12 Som ett resultat av detta kommer typ B-drottningar att ha starka anti-A-antikroppar i sin colostrum utan någon tidigare exponering från dräktighet eller transfusion. Kattungar av typ A kommer också att utveckla antikroppar, men dessa anses i allmänhet vara mindre potenta. Eftersom antikroppar kan överföras till en kattunge via colostrum i upp till 16 timmar efter födseln kan kattungar som föds friska plötsligt blekna av den hemolytiska anemi som utvecklas. Denna hemolytiska anemi uppträder i allmänhet hos kattungar av typ A eller AB som fötts av B-drottningar som parats med typ A-tomtar.13
Katter av typ AB anses vara universella mottagare eftersom de saknar anti-A- och anti-B-antikroppar; de bör dock transfunderas med celler av typ A för att undvika att oavsiktligt transfundera potenta anti-A-antikroppar från en typ B-donator, vilket är ett exempel på en mindre allvarlig biverkning. På grund av effekterna av geografi och ras på frekvensen av blodtyper kan risken för att framkalla en potentiellt dödlig transfusionsreaktion hos mottagare av blodgrupp B vara så hög som 20 % vid transfusion av blod som inte är matchat.
Mik-antigen
Ett nytt antigen, Mik, rapporterades 2007 och finns hos många domestic shorthaired cats.14 Katter som saknar detta antigen (cirka 6 % av de testade) har potential att utveckla en akut hemolytisk reaktion efter transfusion av AB-matchat blod. Eftersom typserum inte finns tillgängligt för Mik-antigenet och antikroppar verkar förekomma naturligt, är det klokt att korsmatcha även typmatchade katter före en transfusion.
Blodtypning och korsmatchning
Färsk insamlat blod i EDTA och en koagel eller ett vanligt rör från både mottagare och givare rekommenderas för typning och korsmatchning, såvida inte givaren har undersökts för antikroppar tidigare, i vilket fall endast givarceller från EDTA-provet behövs. Alternativt kan rörsegment (”pigtails”) (figur 1) användas från givarenheten så länge enhetens sterilitet är intakt. Proverna skall vara fria från hemolys och lipemi.
Figur 1. ”Pigtails” från givarenheten får användas för blodgruppering och för korsmatchning med mottagaren så länge enhetens sterilitet är intakt. (Foto av Charlie Kerlee.)
Kommersiella blodtypningssatser finns tillgängliga för hundar och katter och kan användas för att undersöka potentiella givare och för att göra lämpliga val för korsmatchning och transfusioner baserat på mottagarens blodgrupp. Exempel är typningskort (DMS Laboratories) och en immunokromatografisk patron (Alvedia) (tabell 1). Dessa kit typiserar endast för DEA 1.1 hos hundar och för A, B och AB hos katter. Både korten och patronen är relativt enkla typningsmetoder som endast tar några minuter att köra och innehåller ett sätt att utföra en autokontroll för att identifiera eventuell interferens från autoagglutination. Med hjälp av en 2+ agglutinerande slutpunktsreaktion för korten erhölls i en studie tre falskt negativa och fem falskt positiva reaktioner av 88 testade hundprover.15 Detta problem har enligt uppgift korrigerats.16 I samma studie erhölls inga falskt negativa och sex falskt positiva resultat med patronen. Ett test med gelkolonndiffusionstest (DiaMed) som användes i den studien är inte längre tillgängligt för den veterinära marknaden.
Tabell 1: Utvalda webbplatser för blodtypning och blodprodukter
Felaktiga resultat kan erhållas om man inte följer instruktionerna för kitet. Autoagglutination och korskontaminering från tidigare använda omrörningspinnar kan ge falskt positiva resultat med korttypningsmetoder. Falskt negativa resultat kan erhållas med blod från extremt anemiska djur (PCV < 10 %) och från en prozonreaktion (överskott av antikroppar i förhållande till mängden närvarande antigen).17
En nyligen genomförd studie tyder på att ett grundligare, utökat typningskit kan komma att bli tillgängligt, som kan typa för DEA 1.1, 3, 4, 7 och Dal.18 En lämplig utspädning av typningsreagenset för DEA 1.2 identifierades inte, och DEA 5 ingick inte. I denna studie fick 10 hundar DEA 1.1-kompatibla transfusioner och korsmatchades före och efter transfusionerna. Sex av korsmatchningarna hos fyra av hundarna kunde ha utvecklat antikroppar baserat på typningsresultaten, och fyra korsmatchningar som involverade två hundar blev inkompatibla 21-23 dagar senare med reaktionsstyrkor som varierade från 3+ till 4+. En tredje hund hade en 1+ inkompatibilitet vid dag 13 som blev kompatibel vid dag 50. Fem korsmatchningar av fyra hundar förväntades inte utveckla antikroppar på grundval av de utvidgade typningsresultaten, men större inkompatibla korsmatchningsresultat erhölls med en styrka från 1+ till 3+ under loppet av två till fyra veckor. Dessa inkompatibla resultat tyder på sensibilisering för antigener som inte upptäcks genom typningsprocessen (t.ex. DEA 5, 6, 8).
Även om dessa typningsmetoder är relativt enkla, läs noga igenom bipacksedlarna för att hitta källor till potentiellt felaktiga resultat och följ instruktionerna exakt. När bekräftande testning är nödvändig, t.ex. för att välja ut permanenta donatorer, för att kontrollera tvivelaktiga resultat eller i stället för intern typning vid elektiva operationer, kan externa laboratorier, t.ex. Animal Blood Resources International i Stockbridge, Michigan, eller University of Pennsylvania’s Hematology and Transfusion Laboratory, användas. Det utökade alternativet med ett kit för blodtypning kan utvidga dessa möjligheter till andra testplatser.
En större korsmatchning testar för detekterbara naturligt förekommande eller inducerade antikroppar i mottagarens serum mot givarens erytrocyter. Detta test bör göras varje gång en patient sannolikt har relevanta naturligt förekommande antikroppar (katter), om patientens transfusionshistoria är okänd eller om en transfusion har skett minst två till fyra dagar tidigare, även om den skedde med samma givare.1,8,19,20 Kommersiella korsmatchningssatser finns tillgängliga från DMS Laboratories.
En mindre korsmatchning testar om det går att påvisa antikroppar i givarplasma eller -serum mot patientens erytrocyter. Även om de anses mindre viktiga, förekommer mindre biverkningar ibland. Permanenta givare kan väljas på grundval av kommersiellt erbjudna reagenser för blodtypning och screening för antikroppar för att minimera risken för en mindre biverkning. Typnings- och korsmatchningssatserna innehåller vanligtvis kontroller för att utesluta falskt positiva reaktioner på grund av autoagglutination eller hävdar att det inte förekommer någon interferens från autoagglutination.
En slidkorsmatchning är en grov metod för korsmatchning som endast bör reserveras för nödsituationer. I det här fallet består den stora slidkorsmatchningen av att blanda två droppar mottagarplasma med en droppe blod från givaren i rumstemperatur på ett rent glasobjektsglas och observera för agglutination medan man roterar objektglaset i en minut. En mindre korsmatchning kan utföras på samma sätt med två droppar donatorplasma och en droppe mottagarblod. Två potentiellt allvarliga fel kan dock uppstå med denna metod. För det första kan potentiellt dödliga hemolytiska reaktioner missas eftersom hemolys är svår att känna igen med denna metod. För det andra kan detta förfarande missa prozonreaktioner där förekomsten av ett överskott av antikroppar i förhållande till mängden antigen kan leda till att agglutinationen misslyckas.
DETEKTERING AV EN TRANSFUSIONSREAKTION
En akut intravaskulär hemolytisk transfusionsreaktion kan inträffa hos katter av typ B som får blod av typ A. En allvarlig reaktion uppträder oftast hos hundar som tidigare sensibiliserats för DEA 1.1-blod, men den har också rapporterats hos hundar som sensibiliserats mot DEA 4, Dal eller en oidentifierad typ (icke-DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 7).1,4,5,7 Tecken i samband med akuta hemolytiska transfusionsreaktioner börjar vanligtvis omedelbart efter det att transfusionen påbörjats och kan inkludera feber, förändrad hjärtfrekvens, hypotoni, dyspné, förlust av kontroll över urinblåsa och tarm, kräkningar, hemoglobinemi och hemoglobinuri.21 Eftersom de transfunderade cellerna genomgår hemolys, misslyckas den packade cellvolymen (PCV) med att öka. Sekvenser kan inkludera disseminerad intravaskulär koagulation, njursvikt, chock och död. Reaktionens svårighetsgrad är förknippad med antikroppstitern och den transfunderade blodmängden. Om något av tecknen utöver feber noteras ska transfusionen avbrytas och lämplig behandling inledas.
Halveringstiden för typkompatibelt blod som administreras till hundar och katter är cirka tre respektive fem veckor. Fördröjda transfusionsreaktioner är mer försåtliga än akuta reaktioner och kan förbises eller tillskrivas andra händelser, t.ex. en antibiotikarelaterad allergi. I dessa fall kan PCV stiga som förväntat och sedan sjunka under loppet av flera dagar till veckor. Eftersom hemolysen är extravaskulär kan ikterus och hyperbilirubinuri noteras.
En första transfusion av typ B till en typ A-katt kan resultera i en fördröjd hemolytisk reaktion. Fördröjda reaktioner kan också förekomma hos hundar som för första gången får DEA 1.1 eller DEA 7 blod och som är negativa för dessa antigener samt hos hundar som tidigare sensibiliserats mot svagare antigener. Donatorer som anses vara DEA 1-negativa kan i själva verket vara av typ DEA 1.2 om man enbart förlitar sig på resultaten från det interna typningskitet. Helst bör permanenta donatorer om möjligt genomgå en fullständig typning och antikroppsscreening. De interna DEA 1.1-typningssatserna bör reserveras för screening av potentiella givare och typning av mottagare som kräver omedelbar transfusionsbehandling.
En hund som får blodgruppsmatchad för DEA 1.1 kan fortfarande vara felmatchad för något av de andra antigenerna. Universaldonatorer bör endast vara positiva för DEA 4 eftersom det är ett vanligt antigen och kommer att inducera sensibilisering endast hos den sällsynta hund som saknar det. Det är dock viktigt att komma ihåg att universaldonatorblod endast är känt för att vara negativt för DEA 1.1, 1.2, 3, 5 och 7. De svårfångade DEA 6 och 8 och flera andra antigener för vilka det inte finns några typsera kan finnas på universaldonatorns erytrocyter och kan sensibilisera en mottagare som är negativ för ett eller flera av dessa antigener. Dal-antigenet måste också beaktas vid transfusion av dalmatiner.
GUIDE FÖR TYPNING OCH KORSMATCHNING AV HUNDAR
Korsmatchning kan inte upptäcka låga koncentrationer av antikroppar eller förutsäga potentialen att utveckla antikroppar mot felmatchat blod. Upprepade transfusioner kan vara en sällsynt företeelse i vissa mottagningar, men för de som har en stor mängd patienter med kronisk njursjukdom eller som får kemoterapi eller de som har ihärdiga ägare som kämpar mot en ihållande immunmedierad hemolytisk anemi hos sina husdjur, är upprepade transfusioner inte ovanliga. I dessa fall där man räknar med flera transfusioner kan man maximera transfusionseffektiviteten genom att välja donator på grundval av blodgrupp.
Tabell 2: Process för typning och korsmatchning av hundar
Följandet av några enkla steg (tabell 2) kan hjälpa dig att avgöra om en enkel DEA 1.1-typning är tillräcklig eller om det behövs en mer fullständig typning och om det är nödvändigt att korsmatcha hundar för att minimera transfusionsreaktioner och sensibilisering mot transfunderat blod. I korthet är DEA 1.1-typmatchat blod tillräckligt för en förstagångsmottagare som kräver omedelbar transfusionsbehandling. Även om sensibilisering uppstår uppväger fördelarna med transfusionen sannolikt den förkortade halveringstiden för de transfunderade cellerna. Universellt donatorblod rekommenderas som förstahandsval närhelst det är möjligt och i synnerhet när upprepade transfusioner förväntas. Korsmatchning är inte till någon hjälp för en mottagare som får blod för första gången (eller som nyligen fått blod), men krävs om mottagaren har fått en transfusion fyra eller fler dagar tidigare eller om han eller hon är en dalmatiner. Gemensamma antigener som saknas hos en sensibiliserad mottagare kan göra det svårt att hitta kompatibelt donatorblod. I dessa fall är det troligare att man lyckas med korsmatchning mot syskon eller donatorer av samma ras.
Linda M. Vap, DVM, DACVP
Avdelningen för mikrobiologi, immunologi och patologi
College of Veterinary Medicine and Biomedical Sciences
Colorado State University
Fort Collins, CO 80523
1. Hohenhaus AE. Betydelsen av blodgrupper och blodgruppsantikroppar hos sällskapsdjur. Transfus Med Rev 2004;18(2):117-126.
2. Swisher SN, Young LE, Trabold N. Studier in vitro och in vivo av beteendet hos erytrocyt-isoantikroppssystem för hundar. Ann N Y Acad Sci 1962;97:15-25.
3. Symons M, Bell K. Expansion av blodgruppssystemet A för hundar. Anim Genet 1991;22(3):227-235.
4. Melzer KJ, Wardrop KJ, Hale AS, et al. En hemolytisk transfusionsreaktion på grund av DEA 4 alloantikroppar hos en hund. J Vet Intern Med 2003;17(6):931-933.
5. Hale AS. Hundens blodgrupper och deras betydelse för veterinärmedicinsk transfusionsmedicin. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1995;25(6):1323-1332.
6. Wardrop K. Klinisk blodtypning och korsmatchning. I: Feldman BF, Zinkl JG, Jain NC, et al. Schalm’s veterinary hematology. 5th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott Williams & Wilkins, 2000.
7. Blais MC, Berman L, Oakley DA, et al. Canine Dal blood type: a red cell antigen lacking in some Dalmatians. J Vet Intern Med 2007;21(2):281-286.
8. Giger U, Bucheler J, Patterson DF. Frekvens och arv av blodtyperna A och B hos kattraser i USA. J Hered 1991;82(1):15-20.
9. Giger U, Kilrain CG, Filippich LJ, et al. Frekvenser av blodgrupper hos kattdjur i USA. J Am Vet Med Assoc 1989;195(9):1230-1232.
10. Giger U, Griot-Wenk M, Bucheler J, et al. Geografisk variation av frekvensen av kattblodgrupper i Förenta staterna. Fel Pract 1991;19:21-26.
11. Forcada Y, Guitian J, Gibson G. Frekvenser av kattblodtyper vid ett remissjukhus i sydöstra England. J Small Anim Pract 2007;48(10):570-573.
12. Bucheler J, Giger U. Alloantikroppar mot blodgrupperna A och B hos katter. Vet Immunol Immunopathol 1993;38(3-4):283-295.
13. Bucheler J. Fading kitten syndrome och neonatal isoerytrolys. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1999;29(4):853-870.
14. Weinstein NM, Blais MC, Harris K, et al. En nyligen erkänd blodgrupp hos domestic shorthair katter: Mik red cell antigen. J Vet Intern Med 2007;21(2):287-292.
15. Seth MWS, Jackson KV, Giger U. Comparison of gel column, card and cartridge techniques for DEA 1.1 blood typing of dogs, in Proceedings. 26th Annu ACVIM Forum 2008; 775.
16. Marino B. DMS Laboratories Inc, Flemington, NJ: E-postkommunikation, 2009.
17. Bipacksedel. RapidVet-H blodgruppsbestämningstest för hund (06/2009) och katt (09/2008). DMS Laboratories, Inc, Flemington, NJ. www.rapidvet.com.
18. Kessler RJ, Reese J, Chang D, et al. Dog erythrocyte antigens 1.1, 1.2, 3, 4, 7, and Dal blood typing and cross-matching by gel column technique. Vet Clin Pathol 2010 .
19. Giger U. Blodtypning och korsmatchning för att säkerställa kompatibla transfusioner. I: Bonagura JD, ed. Kirk’s current veterinary therapy XIII. Philadelphia, Pa: WB Saunders, 2000;396-399.
20. Giger U. Blodtypning och korsmatchning. I: Bonagura JD, Twedt DC, eds. Kirk’s current veterinary therapy XIV. Louis, Mo: Saunders Elsevier, 2009;260-265.
21. Brown D, Vap LM. Principer för blodtransfusion och korsmatchning. In: Thrall MA, Baker DC, Campbell TW, et al., eds. Veterinär hematologi och klinisk kemi. Baltimore, Md: Lippincott Williams & Wilkins, 2004:795-798.