Blutgruppen sind Klassifizierungen vererbbarer artspezifischer Antigene auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen. Bei Hunden werden sieben Blutgruppen erkannt, bei Katzen vier. Auch andere Zellen wie Leukozyten, Blutplättchen oder Zellen in anderen Geweben können diese Antigene aufweisen. Alloantikörper (oder Isoantikörper) sind Antikörper, die im Serum gegen ein Antigen eines anderen Tieres der gleichen Spezies vorhanden sind. Diese können auf natürliche Weise erworben (z. B. durch die Aufnahme von Kolostrum) oder durch eine frühere Exposition (z. B. durch eine Transfusion) induziert werden, und ihr Vorhandensein wird durch eine Kreuzprobe nachgewiesen.
Die Transfusion von Blutprodukten kann bei Tierpatienten ein breites Spektrum schädlicher Wirkungen hervorrufen. Einige dieser Wirkungen sind üblich und können unvermeidbar sein (z. B. Fieber), aber andere, wie immunvermittelte akute und verzögerte Transfusionsreaktionen, die direkt mit ungeeigneten Typ- und Kreuzprobenverfahren bei Hunden und Katzen verbunden sind, können minimiert werden.
In diesem Artikel gebe ich einen Überblick über die Blutgruppenbestimmung bei Hunden und Katzen und die richtige Kreuzprobe. Außerdem gebe ich Entscheidungsempfehlungen für Tierärzte, um Transfusionsreaktionen zu vermeiden, und gehe auf die Anzeichen ein, die beim Auftreten einer Reaktion beobachtet werden können.
KATZENBLUTTYPEN UND ANTIKÖRPER
Die Blutgruppen von Hunden sind nach dem DEA-System (Dog Erythrocyte Antigen) nummeriert.
DEA 1.1, 1.2 und 1.3
DEA 1 wurde früher als A bezeichnet und besteht aus vier Allelen: negativ, 1.1, 1.2 und 1.3. DEA 1.1 wird autosomal dominant gegenüber DEA 1.2 vererbt, und der Nulltyp ist rezessiv gegenüber beiden. DEA 1.1 und DEA 1.2 sind die wichtigsten Antigene und kommen zusammen bei etwa 60 % der Hunde vor.1 Es kann zu Verwirrung kommen, weil beide Typen als A-positiv gelten; DEA 1.2-Hunde, die 7 bis 29 % der Hunde ausmachen, entwickeln jedoch starke Anti-DEA 1.1-Antikörper, wenn sie mit DEA 1.1-Zellen transfundiert werden.
Während natürlich vorkommende Antikörper gegen diese Antigene im Allgemeinen als nicht existent angesehen werden, können erstmalige Transfusionen mit DEA 1.1-Blut mit einer verringerten zirkulierenden Lebensdauer der transfundierten Zellen verbunden sein, und nachfolgende Transfusionen werden mit einer akuten hämolytischen Reaktion verbunden sein. Die Transfusion von DEA 1.2-Blut an einen sensibilisierten DEA-negativen Hund führt zu einem exponentiellen Zellverlust im Laufe mehrerer Wochen, wobei etwa die Hälfte der transfundierten Zellen innerhalb der ersten 10 Tage verloren geht.2 DEA 1.3 ist nur von Hunden aus Australien bekannt, vor allem von Deutschen Schäferhunden.3
DEA 4
DEA 4 kommt bei bis zu 98 % der Hunde vor, und Hunde mit diesem Typ allein gelten als Universalspender. Nur etwa 75 % der Dobermannpinscher sind DEA 4 positiv. Natürlich vorkommende DEA 4-Antikörper sind nicht bekannt; allerdings können hämolytische Transfusionsreaktionen nach Sensibilisierung mit DEA 4 positiven Bluttransfusionen bei Hunden auftreten, denen dieses Antigen fehlt.4
DEA 3 und 5
DEA 3 und 5 werden in geringeren Anteilen der Hundepopulation exprimiert, aber DEA 3 kommt bei 23% der Windhunde vor, und 30% der Windhunde sind DEA 5 positiv. Natürlich vorkommende Antikörper sind bei 20 % der DEA-3-negativen und 10 % der DEA-5-negativen Hunde in den Vereinigten Staaten vorhanden.2
DEA 7
DEA 7 kommt bei 8 bis 45 % der Hunde in den USA vor. Es wurden natürlich vorkommende Antikörper gegen DEA 7 beobachtet, wobei eine verzögerte Transfusionsreaktion zu einer verringerten Lebensdauer der transfundierten Zellen, jedoch nicht zu einer Hämolyse führte.5,6 Obwohl die Bedeutung des Antigens umstritten ist, ist es am besten, den vorzeitigen Verlust der transfundierten Zellen zu vermeiden, indem Spenderblut verwendet wird, dem dieses Antigen fehlt.
Dal-Antigen
2007 wurde über ein neues Antigen berichtet, das bei etwa 93 % der Hunde in den USA vorkommt.7 Es wurde vorübergehend Dal genannt, weil der Indexfall einen Dalmatiner betraf. Der Dalmatiner war DEA 1.1, 3, 4 und 5-positiv und DEA 7-negativ typisiert, wurde aber nach mehreren Transfusionen wegen chronischer Niereninsuffizienz mit Blut, das nur DEA 1.1, 4-positiv typisiert war, sensibilisiert. Da weitere Transfusionen erforderlich waren, wurde ein Kompatibilitätstest verlangt. Größere Kreuzproben zwischen dem Indexhund und 55 nicht-dalmatinischen Spendern, die aufgrund der Blutgruppen DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5 und 7 hätten kompatibel sein müssen, waren nicht kompatibel. Große Kreuzproben zwischen dem Indexhund und nur 20 von 25 (80 %) nicht verwandten Dalmatinern waren kompatibel. Inkompatible Transfusionen mit diesem Antigen können zu akuten und verzögerten hämolytischen Reaktionen führen. Wenn Transfusionen bei sensibilisierten Dalmatinern notwendig werden, werden kompatible Spender am ehesten innerhalb der Dalmatinerrasse gefunden.
Andere Antigene
Über DEA 6 und 8 sowie über 11 weitere Antigene, von denen angenommen wird, dass sie existieren, ist wenig bekannt, da Typisierungsseren für diese Antigene nicht verfügbar sind. Ohne die Typisierung von Seren für diese Antigene konnte ihre Beziehung zu Dal nicht bestimmt werden.
FELINE BLUTARTEN UND ANTIKÖRPER
Bei Katzen ist nur das AB-System routinemäßig anerkannt worden und besteht aus drei Typen: A, B und AB.
Typ A ist der am weitesten verbreitete und kommt bei mehr als 95 % der kurz- und langhaarigen Hauskatzen in den Vereinigten Staaten vor. Bisher wurden alle Siamkatzen, Burmesen, Tonkinesen, Russisch Blau, Amerikanisch Kurzhaar und Orientalisch Kurzhaar als Typ A identifiziert.8-10 Typ B wurde bei bis zu 10 % der Maine Coon und Norwegischen Waldkatzen, bei bis zu 20 % der Abessinier-, Birma-, Perser-, Somali-, Sphinx- und Scottish-Fold-Katzen und bei bis zu 45 % der exotischen und Britisch Kurzhaar-, Cornish Rex- und Devon Rex-Katzen festgestellt. Der Typ AB wurde sowohl bei Hauskatzen als auch bei Rassen mit Typ B beobachtet.11
Dieses Blutsystem folgt einem einfachen Mendelschen Erbgang, bei dem das A (A)-Gen die Dominanz über das AB (ab)-Gen hat, das wiederum die Dominanz über das B (b)-Gen hat. Katzen vom Typ A können einen von drei Genotypen haben: A-A, A-ab, oder A-b. Katzen vom Typ AB können entweder den Genotyp ab-ab oder ab-b haben, und eine Katze vom Typ B kann nur den Genotyp b-b haben. Ein Zuchtpaar von Katzen des Typs A kann also Jungtiere der Typen A, AB oder B hervorbringen, je nach ihrem Phänotyp.
Im Gegensatz zu Hunden haben Katzen ausgeprägte natürlich vorkommende Antikörper. Alle Kätzchen des Typs B entwickeln innerhalb weniger Wochen nach der Geburt Antikörper, und bis zum Alter von drei Monaten bilden sich hohe Titer.12 Daher haben Kätzinnen des Typs B starke Anti-A-Antikörper in ihrem Kolostrum, ohne dass sie zuvor durch Trächtigkeit oder Transfusionen exponiert waren. Jungtiere vom Typ A entwickeln ebenfalls Antikörper, die jedoch im Allgemeinen als weniger stark angesehen werden. Da Antikörper über das Kolostrum bis zu 16 Stunden nach der Geburt auf ein Kätzchen übertragen werden können, können gesund geborene Kätzchen plötzlich an der sich entwickelnden hämolytischen Anämie zugrunde gehen. Diese hämolytische Anämie tritt in der Regel bei Kätzchen vom Typ A oder AB auf, die von B-Kätzinnen geboren wurden, die mit Katerchen vom Typ A gepaart wurden.13
Katzen vom Typ AB gelten als universelle Empfänger, da ihnen Anti-A- und Anti-B-Antikörper fehlen; sie sollten jedoch mit Zellen vom Typ A transfundiert werden, um zu vermeiden, dass versehentlich starke Anti-A-Antikörper von einem Spender vom Typ B transfundiert werden, was ein Beispiel für eine geringfügige Nebenwirkung ist. Aufgrund der Auswirkungen von Geografie und Rasse auf die Häufigkeit von Blutgruppen könnte das Risiko einer potenziell tödlichen Transfusionsreaktion bei Empfängern der Blutgruppe B bei der Transfusion von nicht passendem Blut bis zu 20 % betragen.
Mik-Antigen
2007 wurde über ein neues Antigen, Mik, berichtet, das bei vielen Kurzhaar-Hauskatzen vorkommt.14 Katzen, denen dieses Antigen fehlt (etwa 6 % der getesteten Katzen), können nach der Transfusion von AB-angepasstem Blut eine akute hämolytische Reaktion entwickeln. Da für das Mik-Antigen kein typisierendes Serum zur Verfügung steht und Antikörper anscheinend natürlich vorkommen, ist eine Kreuzprobe auch bei typisierten Katzen vor einer Transfusion ratsam.
Typisierung und Kreuzprobe
Für die Typisierung und Kreuzprobe werden frisch entnommenes Blut in EDTA und ein Gerinnsel oder ein einfaches Röhrchen sowohl vom Empfänger als auch vom Spender empfohlen, es sei denn, der Spender wurde zuvor auf Antikörper untersucht; in diesem Fall werden nur Spenderzellen aus der EDTA-Probe benötigt. In diesem Fall werden nur die Spenderzellen aus der EDTA-Probe benötigt. Alternativ können auch Schlauchsegmente („Pigtails“) (Abbildung 1) aus der Spendereinheit verwendet werden, solange die Sterilität der Einheit erhalten bleibt. Die Proben sollten frei von Hämolyse und Lipämie sein.
Abbildung 1. „Pigtails“ aus der Spendereinheit können zur Blutgruppenbestimmung und zum Crossmatching mit dem Empfänger verwendet werden, solange die Sterilität der Einheit intakt ist. (Foto von Charlie Kerlee.)
Kommerzielle Bluttypisierungskits sind für Hunde und Katzen erhältlich und können zur Überprüfung potenzieller Spender und zur Auswahl geeigneter Kreuzproben und Transfusionen auf der Grundlage der Blutgruppe des Empfängers verwendet werden. Beispiele hierfür sind Typisierungskarten (DMS Laboratories) und eine immunochromatographische Kartusche (Alvedia) (Tabelle 1). Diese Kits typisieren nur für DEA 1.1 bei Hunden und für A, B und AB bei Katzen. Sowohl die Karten als auch die Kartusche sind relativ einfache Typisierungsmethoden, deren Durchführung nur wenige Minuten in Anspruch nimmt und die eine Möglichkeit zur Durchführung einer Autokontrolle beinhalten, um mögliche Interferenzen durch Autoagglutination zu erkennen. Bei Verwendung einer 2+-Agglutinations-Endpunktreaktion für die Karten wurden in einer Studie bei 88 getesteten Hundeproben drei falsch-negative und fünf falsch-positive Reaktionen erzielt.15 Dieses Problem wurde Berichten zufolge behoben.16 In der gleichen Studie wurden mit der Kartusche keine falsch-negativen und sechs falsch-positive Ergebnisse erzielt. Ein Gel-Säulen-Diffusionstest (DiaMed), der in dieser Studie verwendet wurde, ist für den Veterinärmarkt nicht mehr erhältlich.
Tabelle 1: Ausgewählte Websites zur Blutgruppenbestimmung und zu Blutprodukten
Fehlerhafte Ergebnisse können erzielt werden, wenn die Anweisungen des Kits nicht befolgt werden. Autoagglutination und Kreuzkontamination durch zuvor benutzte Rührstäbchen können bei Kartentypisierungsmethoden zu falsch positiven Ergebnissen führen. Falsch negative Ergebnisse können bei Blut von extrem anämischen Tieren (PCV < 10%) und bei einer Prozonenreaktion (zu viel Antikörper für die vorhandene Antigenmenge) erzielt werden.17
Eine neuere Studie deutet darauf hin, dass ein gründlicheres, erweitertes Typisierungskit verfügbar werden könnte, das für DEA 1.1, 3, 4 und 7 und Dal typisiert.18 Eine geeignete Verdünnung für das DEA 1.2-Typisierungsreagenz wurde nicht ermittelt, und DEA 5 wurde nicht einbezogen. In dieser Studie erhielten 10 Hunde DEA 1.1-kompatible Transfusionen und wurden vor und nach den Transfusionen einer Kreuzprobe unterzogen. Sechs der Kreuzprobenpaare bei vier der Hunde hätten aufgrund der Typisierungsergebnisse Antikörper entwickeln können, und vier Kreuzproben, an denen zwei Hunde beteiligt waren, wurden 21 bis 23 Tage später inkompatibel, wobei die Reaktionsstärken von 3+ bis 4+ reichten. Ein dritter Hund wies am 13. Tag eine 1+ Inkompatibilität auf, die bis zum 50. Tag kompatibel wurde. Bei fünf Kreuzprobe-Paarungen von vier Hunden war aufgrund der erweiterten Typisierungsergebnisse nicht zu erwarten, dass sie Antikörper entwickeln würden; es wurden jedoch im Laufe von zwei bis vier Wochen erhebliche inkompatible Kreuzprobe-Ergebnisse mit Reaktionsstärken von 1+ bis 3+ erzielt. Diese inkompatiblen Ergebnisse deuten auf eine Sensibilisierung gegen Antigene hin, die bei der Typisierung nicht erkannt wurden (z. B. DEA 5, 6, 8).
Auch wenn diese Typisierungsmethoden relativ einfach sind, sollten Sie die Packungsbeilagen sorgfältig auf mögliche Fehlerquellen hin lesen und die Anweisungen genau befolgen. Wenn Bestätigungstests erforderlich sind, z. B. für die Auswahl von Dauerspendern, zur Überprüfung fragwürdiger Ergebnisse oder als Ersatz für die hausinterne Typisierung bei Wahloperationen, können externe Labors wie Animal Blood Resources International in Stockbridge, Michigan, oder das Hämatologie- und Transfusionslabor der Universität von Pennsylvania in Anspruch genommen werden. Die Option des erweiterten Bluttypisierungskits kann diese Möglichkeiten auf andere Teststellen ausdehnen.
Eine wichtige Kreuzprobe testet auf nachweisbare natürlich vorkommende oder induzierte Antikörper im Empfänger-Serum gegen Spender-Erythrozyten. Dieser Test sollte immer dann durchgeführt werden, wenn ein Patient wahrscheinlich relevante natürlich vorkommende Antikörper (Katzen) hat, wenn die Transfusionsanamnese des Patienten unbekannt ist oder wenn eine Transfusion mindestens zwei bis vier Tage zurückliegt, selbst wenn sie vom selben Spender stammte.1,8,19,20 Kommerzielle Kreuzprobe-Kits sind bei DMS Laboratories erhältlich.
Eine geringfügige Kreuzprobe testet auf nachweisbare Antikörper im Spenderplasma oder -serum gegen die Erythrozyten des Patienten. Obwohl sie als weniger wichtig angesehen wird, treten gelegentlich geringfügige Nebenreaktionen auf. Die Auswahl von Dauerspendern kann auf der Grundlage der im Handel erhältlichen Bluttypisierungsreagenzien und des Antikörperscreenings erfolgen, um das Risiko einer geringfügigen Nebenreaktion zu minimieren. Die Typisierungs- und Kreuzprobe-Kits enthalten in der Regel Kontrollen, um falsch-positive Reaktionen aufgrund von Autoagglutination auszuschließen, oder behaupten, dass es keine Beeinträchtigung durch diese gibt.
Ein Objektträger-Kreuzprobe ist eine grobe Methode der Kreuzprobe, die nur für Notfälle reserviert werden sollte. In diesem Fall besteht die große Kreuzprobe darin, dass zwei Tropfen Empfängerplasma mit einem Tropfen Spenderblut bei Raumtemperatur auf einem sauberen Glasobjektträger vermischt werden und die Agglutination beobachtet wird, während der Objektträger eine Minute lang gedreht wird. Eine geringfügige Kreuzprobe kann auf die gleiche Weise mit zwei Tropfen Spenderplasma und einem Tropfen Empfängerblut durchgeführt werden. Allerdings können bei dieser Methode zwei potenziell schwerwiegende Fehler auftreten. Erstens können potenziell tödliche hämolytische Reaktionen übersehen werden, da eine Hämolyse mit dieser Methode schwer zu erkennen ist. Zweitens können bei diesem Verfahren Prozonenreaktionen übersehen werden, bei denen das Vorhandensein eines Überschusses an Antikörpern im Verhältnis zur Antigenmenge zu einem Versagen der Agglutination führen kann.
ERKENNUNG EINER TRANSFUSIONSREAKTION
Eine akute intravaskuläre hämolytische Transfusionsreaktion kann bei Katzen vom Typ B auftreten, die Blut vom Typ A erhalten. Eine schwere Reaktion tritt am häufigsten bei Hunden auf, die zuvor gegen DEA 1.1-Blut sensibilisiert waren, aber es wurde auch von Hunden berichtet, die gegen DEA 4, Dal oder einen nicht identifizierten Typ (nicht DEA 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 7) sensibilisiert waren.1,4,5,7 Die mit akuten hämolytischen Transfusionsreaktionen verbundenen Anzeichen beginnen in der Regel unmittelbar nach Beginn der Transfusion und können Fieber, veränderte Herzfrequenz, Hypotonie, Dyspnoe, Verlust der Blasen- und Darmkontrolle, Erbrechen, Hämoglobinämie und Hämoglobinurie umfassen.21 Da die transfundierten Zellen hämolysiert werden, steigt das gepackte Zellvolumen (PCV) nicht an. Zu den Folgeerscheinungen können disseminierte intravasale Gerinnung, Nierenversagen, Schock und Tod gehören. Der Schweregrad der Reaktion hängt mit dem Antikörpertiter und der transfundierten Blutmenge zusammen. Werden über Fieber hinausgehende Anzeichen festgestellt, sollte die Transfusion abgebrochen und eine entsprechende Therapie eingeleitet werden.
Die Halbwertszeit von typkompatiblem Blut, das Hunden und Katzen verabreicht wird, beträgt etwa drei bzw. fünf Wochen. Verzögerte Transfusionsreaktionen sind heimtückischer als akute Reaktionen und können übersehen oder anderen Ereignissen zugeschrieben werden, z. B. einer antibiotikabedingten Allergie. In diesen Fällen kann der PCV-Wert erwartungsgemäß ansteigen und dann im Laufe von mehreren Tagen bis Wochen wieder abfallen. Da die Hämolyse extravaskulär ist, können Ikterus und Hyperbilirubinurie festgestellt werden.
Eine erstmalige Typ-B-Transfusion bei einer Typ-A-Katze kann zu einer verzögerten hämolytischen Reaktion führen. Verzögerte Reaktionen können auch bei erstmaligen Empfängern von DEA 1.1- oder DEA 7-Blut bei Hunden auftreten, die für diese Antigene negativ sind, sowie bei Hunden, die zuvor gegen schwächere Antigene sensibilisiert wurden. Spender, die als DEA 1 negativ eingestuft werden, können in Wirklichkeit die Blutgruppe DEA 1.2 haben, wenn man sich ausschließlich auf die Ergebnisse des hauseigenen Typisierungskits verlässt. Idealerweise sollten Dauerspender nach Möglichkeit eine vollständige Typisierung und ein Antikörperscreening erhalten. Die hauseigenen DEA 1.1-Typisierungskits sollten dem Screening potenzieller Spender und der Typisierung von Empfängern vorbehalten sein, die eine sofortige Transfusionstherapie benötigen.
Ein Hund, der eine Blutgruppenübereinstimmung für DEA 1.1 erhält, kann dennoch eine Fehlanpassung für eines der anderen Antigene aufweisen. Universalspender sollten nur für DEA 4 positiv sein, da es sich um ein allgemeines Antigen handelt, das nur bei den seltenen Hunden, denen es fehlt, eine Sensibilisierung hervorruft. Es ist jedoch wichtig, daran zu denken, dass Blut von Universalspendern nur für DEA 1.1, 1.2, 3, 5 und 7 negativ ist. Die schwer fassbaren DEA 6 und 8 sowie mehrere andere Antigene, für die es keine Typisierungsseren gibt, können auf den Erythrozyten des Universalspenders vorhanden sein und einen Empfänger sensibilisieren, der negativ für eines oder mehrere dieser Antigene ist. Auch das Dal-Antigen muss bei der Transfusion von Dalmatinern berücksichtigt werden.
Leitfaden für die Typisierung und Kreuzprobe von Hunden
Die Kreuzprobe kann niedrige Konzentrationen von Antikörpern nicht erkennen oder das Potenzial zur Entwicklung von Antikörpern gegen falsches Blut nicht vorhersagen. Wiederholungstransfusionen mögen in manchen Praxen selten vorkommen, aber bei einer großen Anzahl von Patienten mit chronischer Nierenerkrankung oder Chemotherapie oder bei hartnäckigen Besitzern, die mit einer anhaltenden immunvermittelten hämolytischen Anämie bei ihren Haustieren kämpfen, sind Wiederholungstransfusionen keine Seltenheit. In diesen Fällen, in denen mehrere Transfusionen zu erwarten sind, kann die Auswahl des Spenders anhand der Blutgruppe die Wirksamkeit der Transfusion maximieren.
Tabelle 2: Verfahren zur Typisierung und Kreuzprobe von Hunden
Die Befolgung einiger einfacher Schritte (Tabelle 2) kann Ihnen bei der Entscheidung helfen, ob eine einfache DEA 1.1-Typisierung ausreicht oder ob eine vollständigere Typisierung erforderlich ist und ob eine Kreuzprobe von Hunden notwendig ist, um Transfusionsreaktionen und Sensibilisierungen auf transfundiertes Blut zu minimieren. Kurz gesagt, DEA 1.1 typisiertes Blut ist für einen Erstempfänger, der eine sofortige Transfusionstherapie benötigt, ausreichend. Selbst wenn es zu einer Sensibilisierung kommt, überwiegen die Vorteile der Transfusion wahrscheinlich die verkürzte Halbwertszeit der transfundierten Zellen. Universelles Spenderblut wird als erste Wahl empfohlen, wann immer dies möglich ist und vor allem, wenn wiederholte Transfusionen zu erwarten sind. Eine Kreuzprobe ist bei Erstempfängern (oder Empfängern, die erst kürzlich eine Transfusion erhalten haben) nicht hilfreich, ist aber erforderlich, wenn der Empfänger vier oder mehr Tage zuvor eine Transfusion erhalten hat oder ein Dalmatiner ist. Gemeinsame Antigene, die bei einem sensibilisierten Empfänger fehlen, können die Suche nach kompatiblem Spenderblut erschweren. In diesen Fällen ist eine Kreuzprobe mit Geschwistern oder gleichgeschlechtlichen Spendern erfolgversprechender.
Linda M. Vap, DVM, DACVP
Abteilung für Mikrobiologie, Immunologie und Pathologie
College of Veterinary Medicine and Biomedical Sciences
Colorado State University
Fort Collins, CO 80523
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