Sílica e alumina não são as únicas fases sólidas possíveis. Fases estacionárias podem ser adquiridas que possuem longas cadeias de carbono ligadas a contas de sílica. Por exemplo, uma coluna C18 contém grânulos que têm cadeias de 18 carbono-correntes ligadas a eles. Estas fases estacionárias são pós, como sílica, e podem ser carregadas em uma coluna como a lata de sílica.
A coluna C18 é um exemplo de uma coluna de “fase reversa”. As colunas de fase reversa são frequentemente utilizadas com mais solventes polares como água, metanol ou acetonitrilo. A fase estacionária é um hidrocarboneto não polar, enquanto a fase móvel é um líquido polar.
A mesma abordagem também pode ser usada em TLC. Se uma placa é pulverizada com uma camada de esferas C18, então podemos eluir a placa num solvente polar e separar os compostos numa amostra. É claro que agora as coisas estão invertidas. Os compostos mais polares passarão mais tempo na fase móvel, e se moverão mais rapidamente. Os compostos menos polares passarão mais tempo na fase estacionária, e se moverão mais lentamente.
Figure {2}(PageIndex{2}): Um desenho animado de cromatografia de fase reversa.
Exercício \(\PageIndex{1})
Em uma coluna de sílica (SiO2), três compostos foram eluídos na seguinte ordem usando uma mistura de hexanos / acetato de etilo: p-dimetilbenzeno, p-dimetoxibenzeno, depois p-metoxifenol. Qual seria a ordem de eluição em uma coluna C18?
Resposta
p-methoxyphenol, depois p-dimetoxibenzeno, depois p-dimetilbenzeno
Exercicio \(\PageIndex{2})
Você está tentando eluir uma amostra em uma coluna C18 usando uma mistura de 20:80 de água:acetonitrilo, mas os compostos estão demorando muito para atravessar a coluna. O que você deve fazer?
Resposta
Os compostos não estão passando muito tempo na fase móvel, e têm uma afinidade muito maior para a fase não-polar estacionária; use mais acetonitrilo e menos água na fase móvel.t.
Uma das vantagens da cromatografia de fase reversa é que há muitos tipos de fase estacionária a partir da qual se pode escolher. Mudando o tipo de cadeia que é para o grânulo, podemos alterar o quão fortemente ele irá interagir com certas moléculas. Talvez uma embalagem completamente saturada de hidrocarbonetos interaja bem com os hidrocarbonetos saturados na amostra, fazendo-os eluir mais lentamente. Por outro lado, talvez uma embalagem mais rígida que contenha aromáticos interaja melhor com os hidrocarbonetos aromáticos da amostra, fazendo com que estes se eluam mais lentamente. Podemos até ter alguns grupos polares misturados, para obter uma mistura de interações.
Exercício \(\PageIndex{3})
Prever a ordem em que os seguintes compostos se eluem a partir de uma coluna de fase reversa.
- butilbenzeno e benzilamina
- 2-decanol e ácido decanóico
- 1-heptanol e 1-hepteno
- éter octanal e metil octílico
Resposta a
benzilamina e depois butilbenzeno
Resposta b
2-decanol e depois ácido decanóico
Resposta c
1-heptanol e depois 1-hepteno
Resposta d
octanal e depois éter metílico de octy
Atribuição
Chris P Schaller, Doutorado.D., (Colégio de São Bento / Universidade de São João)