Free Press

Silica en alumina zijn niet de enige mogelijke vaste fasen. Er kunnen stationaire fasen worden gekocht die lange koolstofketens bevatten die aan silicakorrels zijn gebonden. Een C18-kolom bijvoorbeeld bevat korrels waaraan 18 koolstofketens zijn gehecht. Deze stationaire fasen zijn poeders, net als silica, en kunnen net als silica in een kolom worden geladen.

Een C18-kolom is een voorbeeld van een “omgekeerde fase”-kolom. Omgekeerde-fasekolommen worden vaak gebruikt met polaire oplosmiddelen zoals water, methanol of acetonitril. De stationaire fase is een apolaire koolwaterstof, terwijl de mobiele fase een polaire vloeistof is.

Dezelfde aanpak kan ook worden gebruikt in TLC. Als een plaat wordt bespoten met een laag C18-korrels, dan kunnen we de plaat elueren in een polair oplosmiddel en verbindingen in een monster scheiden. Natuurlijk zijn de zaken nu omgekeerd. De meest polaire verbindingen zullen de meeste tijd in de mobiele fase doorbrengen en het snelst bewegen. De minst polaire verbindingen zullen de meeste tijd in de stationaire fase doorbrengen en zich het langzaamst verplaatsen.

Figuur (Pagina-index{2}): Een schema van omgekeerde fase chromatografie.

Een van de voordelen van omgekeerde-fasechromatografie is dat er vele soorten stationaire fase zijn waaruit u kunt kiezen. Door het soort keten dat aan de kraal zit te veranderen, kunnen we veranderen hoe sterk deze met bepaalde moleculen zal interageren. Misschien heeft een volledig verzadigde koolwaterstofpakking een goede wisselwerking met verzadigde koolwaterstoffen in het monster, waardoor deze langzamer elueren. Aan de andere kant zal een meer rigide verpakking die aromaten bevat misschien beter interageren met aromatische koolwaterstoffen in het monster, waardoor deze langzamer elueren. Misschien zitten er zelfs polaire groepen in, zodat we een mengsel van interacties krijgen.