Silica și alumina nu sunt singurele faze solide posibile. Se pot achiziționa faze staționare care au lanțuri lungi de carbon legate de bile de silice. De exemplu, o coloană C18 conține perle care au lanțuri de 18 atomi de carbon atașate la ele. Aceste faze staționare sunt pulberi, ca și silicea, și pot fi încărcate într-o coloană la fel ca și silicea.
O coloană C18 este un exemplu de coloană „cu fază inversă”. Coloanele cu fază inversă sunt adesea utilizate cu solvenți mai polari, cum ar fi apa, metanolul sau acetonitrilul. Faza staționară este o hidrocarbură nepolară, în timp ce faza mobilă este un lichid polar.
Aceeași abordare poate fi folosită și în TLC. Dacă o placă este pulverizată cu un strat de bile de C18, atunci putem elua placa într-un solvent polar și putem separa compușii dintr-o probă. Bineînțeles, lucrurile sunt inversate acum. Compușii cei mai polari vor petrece cel mai mult timp în faza mobilă și se vor deplasa cel mai rapid. Compușii cei mai puțin polari vor petrece cel mai mult timp în faza staționară și se vor deplasa cel mai lent.
Figura \(\PageIndex{2}\): O caricatură a cromatografiei în fază inversă.
Exercițiu \(\PageIndex{1}\)
Pe o coloană de silice (SiO2), trei compuși au fost eluzionați în următoarea ordine folosind un amestec hexani / acetat de etil: p-dimetilbenzen, p-dimetoxibenzen, apoi p-metoxifenol. Care ar trebui să fie ordinea de eluție pe o coloană C18?
Răspuns
p-metoxifenol, apoi p-dimetoxibenzen, apoi p-dimetilbenzen
Exercițiu \(\PageIndex{2}\)
Încercați să eluați o probă pe o coloană C18 folosind un amestec 20:80 de apă:acetontril, dar compușilor le ia prea mult timp să treacă prin coloană. Ce ar trebui să faceți?
Răspuns
Compușii nu petrec mult timp în faza mobilă și au o afinitate mult mai mare pentru faza staționară nepolară; folosiți mai mult acetonitril și mai puțină apă în faza mobilă.t.
Unul dintre avantajele cromatografiei în fază inversă este că există multe tipuri de fază staționară din care se poate alege. Prin schimbarea tipului de lanț care se află la bilă, putem modifica cât de puternic va interacționa aceasta cu anumite molecule. Poate că o garnitură de hidrocarburi complet saturate interacționează bine cu hidrocarburile saturate din probă, făcându-le să se elueze mai lent. Pe de altă parte, poate că o garnitură mai rigidă care conține substanțe aromatice va interacționa mai bine cu hidrocarburile aromatice din probă, făcând ca acestea să se elueze mai lent. S-ar putea chiar să avem și câteva grupe polare amestecate, pentru a obține un amestec de interacțiuni.
Exercițiu \(\PageIndex{3}\)
Prediciți ordinea în care următorii compuși ar elua dintr-o coloană cu fază inversă.
- butilbenzen și benzilamină
- 2-decanol și acid decanoic
- 1-heptanol și 1-heptene
- octanal și metil-octil eter
Răspuns a
benzilamină apoi butilbenzen
Răspuns b
2-decanol apoi acid decanoic
Răspuns c
1-heptanol apoi 1-heptene
Răspuns d
octanal apoi eter metilic octanic
Atribuții
Chris P Schaller, Ph.D., (College of Saint Benedict / Saint John’s University)
.